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- 2025年07月10日
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赫澎（上海）生物
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文献和实验相关专题 生物实验中的封闭剂 Q：western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么? A：脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。 Q：请问封闭液和抗体稀释液用BSA 和脱脂奶粉有什么区别呢? 有人跟我说奶粉的封闭效果更好些，但是通常只能用于WesterBlot，如果要做ELISA或者phage display
Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法，但是要想得到较好的结果并不容易，只有找到合适的实验条件并进行优化，才能以更少的时间得到更多的结果，达到事半功倍的效果！下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据：一抗浓度对实验结果的影响抗体：Human/Mouse/Rat RSK1 Antibody (Catalog # AF992)样本：人 HeLa 细胞 (Fig.1)A：5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于
是不是做 Western 的时候，会遇到这样的情况呢？没错，就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。但其实，封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种？除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的？第一种封闭液就是脱脂奶粉，这是异常便宜的封闭液品种，当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。（甚至我们用过特仑苏）但是，你们应该注意到的是，脱脂奶粉中有大量的生物素，也就是说你做的蛋白要是用生物素标记的，一抗也是抗生物素的。那用脱脂奶粉
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