鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒(国产,进口)

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鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒(国产,进口)是高品质的动物疫病PCR检测试剂盒，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒等动物疫病PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒(国产,进口)
编号：DL104
规格：20次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
【注意】 用前请认真阅读注意事项。
【用途] 用于鸡减蛋综合征病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号　　 数量　　 保存　　
SR-I　　 4mL 室温
SR-II　　 10mL 室温
SR-III　　 24mL 室温
TU-1　　 500μl 室温
TU-2　　 60μl 　-20℃　
TU-3　　 1.4mL 　-20℃　
TU-4　　 250μl 　-20℃　
TU-5　　 20μl 　-20℃　
TU-6　　 20μl 　-20℃　
TU-7　　 25μl 　-20℃　
TU-8　　 60μl 　-20℃　
T　　 400μl 　-20℃　
【操作步骤】　　
1. 病料处理　　
取适量输卵管、卵巢、心、脾、肺脏等组织病料，于灭菌研钵充分研磨，用Hanks液或PBS按照1：3稀释成均匀乳剂，　-20℃　反复冻融3次以上。
2. DNA的提取　　
(1) 取已冻融好的病料，1000rpm离心5min，取上清200μl（或质控样品T，200μl），加25μl TU-1和3μl TU-2，　50℃　水浴1～2h，期间轻柔振荡几次帮助裂解。
（2）加入200μl SR-I，剧烈颠倒轻摇充分混匀，　70℃　放置10min。
（3）冷却后加入100μl异丙醇，充分混匀后，加入一个吸附柱（试剂盒内提供）中（吸附柱放入收集管中）10000rpm离心30秒，弃掉收集管中的废液。
（4）加入500μl SR-Ⅱ，10000rpm离心30秒，弃废液。
（5）加入700μl SR-Ⅲ，10000rpm离心30秒，弃废液。
（6）再加入500μl SR-Ⅲ，10000rpm离心30秒，弃废液。
（7）将吸附柱放回空收集管，13000rpm离心2min。
（8）取出吸附柱，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加入70μl TU-3（使用前事先预热至65　-70℃　，有助于提高洗脱效果），室温放置3～5min，12000rpm离心1min，将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心1min。
（9）洗脱液即为模板，可放在2～8℃，如果要长时间存放，可以放置在　-20℃　。
3. PCR操作　　
加样体系：将下列试剂加入0.5 mL PCR反应管中，最好在冰浴条件下加样。
TU-4　　 12.5μl
TU-5　　 1.0μl
TU-6　　 1.0μl
模板　　 10.5μl
4.电 泳　　
配制1%琼脂糖凝胶，取PCR产物5uL混合1μl TU-7，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3μl TU-8，在120v 电压下，1×TAE液中电泳15分钟，在紫外成像仪下观察结果。
【注意事项】
1. 每次使用，开盖之前请先瞬时离心，使试剂沉于管底。
2. 本试剂盒为20头份量试剂，操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况，不予负责。
3. 所有试剂在要求温度下保存，　-20℃　保存试剂尽量减少反复冻融，使用后的试剂立即放回，避免在室温搁置太久。
4. 尽量建立PCR试验操作区，避免交叉污染。
5. 加样和反应程序严格按照说明书进行，由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况，不予负责。
6. 吸头、离心管和PCR管在使用前，要高压灭菌，操作过程尽量不要用手接触到管内壁，可用镊子夹取。
7. 注意防止试剂污染，在有效期限前用完。
【有效期】　　
本制品有效期为1年，生产日期见包装内侧。
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