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- 技术资料
- 保存条件:
-70度
- 保质期:
6个月
- 英文名:
LBA4404农杆菌感受态细胞
- 库存:
大量
- 供应商:
赛泓瑞
产品介绍
LBA4404农杆菌感受态细胞采用化学试剂制备的LBA4404农杆菌感受态细胞,适用于玉米和烟草等植物的转基因操作。
产品特点 具有链霉素和利福平抗性,经植物双元pCAMBIA2301质粒检测,转化效率可达103CFU/ug,-80°C 保存几个月转化效率不发生改变。
产品储存 -70℃ 保存,避免反复冻融
LBA4404农杆菌感受态细胞转化前的准备
1. 冰水浴和37水浴。
2. 液氮或者干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28培养箱中平衡至少15分钟。 (具体操作详见说明书)
操作方法:
1. 取100 μl冰上融化的LBA4404农杆菌感受态细胞,加入目的DNA并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打),冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
LBA4404农杆菌感受态细胞使用注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入目的DNA时应轻柔操作。
3. 生长速度快 8-‐10小时可见克隆。
4.若用氨苄抗生素筛选,应使用含100 µg/ml ampicillin的平板。
LBA4404农杆菌感受态细胞产品用于,仅供研究使用,不适用于人或动物体外治疗与诊断。
南京赛泓瑞生物科技感受态细胞欢迎咨询:
LBA4404农杆菌感受态细胞
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404,接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中,28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养,直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min,4℃、5000r/min、离心5min,弃去上清液。 4.用10ml冷
一.农杆菌感受态细胞的制备 (同大肠杆菌质粒DNA的提取),然后将其转化大肠杆菌,再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM(0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0)液体培养基中,220rpm,28℃振荡培养18 hr
Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
. The most commonly used strains LBA4404 and GV3101 carry chromosomal resistance to rifampicin, each has a Ti-plasmid (carrying vir [virulence] genes) which encodes another antibiotic resistance. This is summarised in the table below. GV3101 are the same as ‘C58C1RifR






