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赛泓瑞
LBA4404农杆菌电转感受态细胞产品介绍
LBA4404菌株为农杆菌Ach5型背景(Hoekema et al., 1983),核基因中含有利福平抗性基因(Rif)。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid),LBA4404菌株含有章鱼碱型Ti质粒pAL4404,该质粒含有vir基因(vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移)。pAL4404质粒含有链霉素抗性(Str),赋予LBA4404菌株链霉素抗性。LBA4404农杆菌适用于番茄、烟草等植物的转基因操作。LBA4404电转感受态特别适用大质粒的转化,经pCAMBIA2301 M质粒检测转化效率大于10的5次方cfu/μg DNA。
LBA4404农杆菌电转感受态细胞
产品储存
LBA4404农杆菌电转感受态细胞的使用操作方法
1. 取10UL连接产物与100UL感受态细胞混匀,冰浴20-30min。
2. 42℃水浴热激45s,立即置冰上放置2min。
3. 加入预热至室温的400UL LB培养基(无抗生素), 37℃恒温摇床培养1h。
4. 取100UL菌液均匀涂布于含相应抗生素抗性的LB平板上, 37℃恒温培养箱倒置培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞避免反复冻融
2. 操作过程中动作要轻柔
LBA4404农杆菌电转感受态细胞产品用于,仅供研究使用,不适用于人或动物体外治疗与诊断。
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