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- 2025年07月16日
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显微切割
原理介绍：在激光脉冲形成的能量差作用下，组织边缘被切断分离，在红外激光作用下瞬间熔化组织并粘附靶标，将靶标吸附在特定的收集帽上。
应用介绍：在高分辨率显微镜放大后可在明场、荧光场条件下对影像中的特定亚细胞结构进行定向分离、捕获，可应用于微生物、动植物、病毒等生物样本的表观基因组、转录组学、蛋白组学单组份研究。
特点：此方法是基于物理分离，对组织损伤小，靶标纯度高，业界认可度高，由于目前受操作者水平、自动化水平影响，通量相对于其他平台相对较小。
主要仪器平台：LEICA ABI MMI
其他同类单组份分离设备:C1平台、 BD流式平台、 10X Genomics 平台
方法学通用路径：以动物组织为例，组织获取---形态鉴定标准明确---切片制备---靶标捕获--进行应用实验验证，低温操作和干燥环境对实验成功与否有重要影响。
项目经验优势：（临床样本为例）本公司已经与海军军医大学东方肝胆医院、浙江大学、第四军医大学、上海交通大学等国内多所知名重点大学合作开展相关研究，研究靶标器官涵盖胆管癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、咽喉癌、心脏瓣膜疾病等，应用方向包括石蜡组织的空间基因组学关联研究、冰冻组织或新鲜组织的空间转录组学，并且都经过验证确认。我们的项目成员涵盖了病理学背景和下一代测序技术的工程师，我们欢迎有蛋白组学背景的科研工作者或爱好者同我们一起开发蛋白质空间组学应用。以下是我们的方法学插图与案例插图，要想获得良好的分离效果和其他组学应用，请与我们联系合作吧，欢迎您的咨询！邮箱：657951487@qq.com
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（eg.feiai肺癌）
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文献和实验激光捕获显微切割技术与生物芯片的联合应用-提高检验组织样品的特异性
人体组织由细胞和细胞间基质组成，肿瘤也不例外。除了肿瘤细胞之外，肿瘤还含有血管、结缔组织等基质。目前，常规对肿瘤样品基因表达量的研究实际上是对肿瘤细胞和基质混合物的研究。基质细胞往往没有癌变，因此对肿瘤细胞和基质混合物进行研究往往会掩盖掉肿瘤细胞中并不是很明显的基因表达异常。 最近复旦大学吴莹教授等利用激光捕获显微切割技术（Laser capture microdissection，LCM）很好的解决了这一难题。相关成果发表在2010年第11期的BMC Genomics上。激光捕获显微切割
这段时间做的LCM显微切割少量组织，提取ng量级RNA的过程奉上。此类RNA可以经两轮扩增后上样进行基因芯片的研究；或直接作为模板进行RT-PCR的研究。虽然过程复杂一些，目前看效果还是不错。 标本来自新鲜的动物或人体的组织标本，取材后液氮速冻后，－80℃存放备用。 标本冰冻切片的要求： 1.每例标本切取覆膜切片5张，玻璃切片一张，厚度8 μm，不染色。切片过程中尽量保持冰冻低温，保持无RNA酶状态。 2.每张切片放置一张组织切片，尽量减少“粗切
、液压控制显微切割和激光捕获显微切割（Laser Capture Microdissection）。 A、手动直接显微切割是早期的切割方式，它是直接在显微镜下手持切割用针分离组织或细胞群，此种方式切割精度低，只适用于对较大块组织中的局部区域或细胞群进行分离，切割单个细胞十分困难； B、机械辅助显微切割是利用普通光学显微镜的微调旋钮控制切割针切割细胞，可采用30G1/2注射用针替代需要专用拉丝设备制作的玻璃切割针，此方式切割精度较手动直接显微切割的精度有了提高，可以达到对较大的单个细胞的切割
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