FITC－羊抗猪IgG北京价格

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FITC－羊抗猪IgG北京价格
品牌：百奥莱博
编号：XH099
规格：0.5ml/5ml
产地：国产|进口
荧光素标记抗体，是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
我们生产的荧光素标记羊抗猪IgG是将异硫氰酸荧光素（FITC，来源于SIGMA），经过常规方法标记在抗体羊抗猪IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，经过过柱，透析，定量，加入稳定剂等，制成FITC－羊抗猪IgG。
保存条件：-20℃冻存。浓度：抗体2mg/ml。
应用范围：FITC－羊抗猪IgG主要用于一抗来源于猪多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化。

主要性能：
FITC为Sigma异构体I，最大吸收峰为495nm，最大发射峰为525nm。
工作液用0.01mol/L pH7.4PBS作1：5～1:20稀释使用，稀释过的抗体尽快用完，不要冻融。
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·Western blotting检测试剂盒（DAB）
编号：XH079
规格：10T
试剂盒组成
1. 封闭试剂：30g(可配制400ml)脱脂奶粉及其他蛋白，缓冲盐等混合物。
2. 10倍浓缩抗体稀释液，50ml。
3. HRP标记二抗，0.5ml，效价1：400。
4. DAB显色液（20×），5ml A+5ml B。
原理：
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
操作步骤：
常规电泳转膜后，
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。 A@ 3) 用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次5min。
3）将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4）用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5）用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次5min。
6）用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml抗体稀释液加入10ulHRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入加入二抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7）用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次10min。
8）配制DAB显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB显色液A、DAB显色液B各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。
注意事项：
1， 请根据一抗来源选择试剂盒。括号里面代标一抗的来源而不是标本的来源。
2， western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3， 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4， 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5， TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml的双蒸水溶解，用盐酸调PH到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水 加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）


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·HB101受体菌
编号：XH047
规格：1ml
基因型：F-，supE44，hsdS20(rB－mB－)，recA13，ara-14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1
细胞种类
高效常用宿主菌E.coli HB101
E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定，使用十分方便，适合于各种基因重组实验。
保存：所有受体菌均为甘油保存，-70℃可长期保存，-20℃可保存一年。

·4×甲醛变性胶上样缓冲液
编号：XH051
规格：1ml
4×甲醛变性胶上样缓冲液
配方（10ml）：
4.0ml 10×MOPS 缓冲液
3.1ml 甲酰胺
2.0ml 100%的甘油
720ul 37%的甲醛
80ul 0.5M EDTA（PH 8.0）
5mg 溴酚蓝
100ul DEPC水
混匀，样品管级吸头经过处理后分装。-20℃保存。常用时可2-8℃存放。
使用方法：取6ul RNA样品加入2ul上样缓冲液混匀上样。
如果只是进行普通的RNA快速电泳，可选用6×RNA loading buffer。常规的琼脂糖，高电压（250V），快速电泳。

·HRP－羊抗鸡IgG
编号：XH101
规格：100ul/1ml
辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗鸡IgG是将辣根过氧化物酶（HRP，来源于SIGMA），经过碘酸钠氧化而标记在抗体羊抗鸡IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，而制成HRP－羊抗鸡IgG。
保存条件：-20℃冻存。浓度：抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围：HRP－羊抗鸡IgG主要用于一抗来源于鸡多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化，Western blotting，ELISA等实验。

主要性能：
免疫组化：1：20～50，DAB显色
免疫印迹法：1：100～400，DAB显色，1：1000～5000，ECL发光显色
ELISA法：1：500～2000（最高可达一万），用TMB显色


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·载体两性电解质PH3.5-10
编号：XH069
规格：12ml
别名：两性电解质两性电解质载体(ph3.5-10)：Ampholyte solution、Ampholine。
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4℃保存。保持期，两年。开启后请尽快用完。

·Western blotting检测试剂盒（ECL发光）
编号：XH078
规格：10T
试剂盒内容：
1. 封闭试剂：30g(可配制400ml)脱脂奶粉及其他蛋白，缓冲盐等混合物。
2. 10倍浓缩抗体稀释液，50ml。
3. HRP标记二抗，0.1ml，效价1：2000-5000。
4. ECL显色液，25mlA+25mlB。
试剂盒原理：
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。最后经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带来（抗原所在位置）。
操作步骤：
常规电泳转膜后，
1. 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2. 按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次5min。
3. 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4. 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5. 用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次5min。
6. 用稀释好的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入5ulHRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7. 用TBS-T ，PH7.6洗液，室温漂洗3次每次10min。
8. 配制ECL发光液：根据用量，取ECL发光液A、ECL发光液B各等量，混匀，加在膜正面，暗室显色5分种。先倾去显色液，再小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，请小心不要错动（余下的胶片请收好）。显色30S到1分种，取出（直接上抬）胶片立即完全浸入显影液中1-2min，再丢入定影液中1分钟，离开暗室，观察结果，根据条带强弱，可再次感光一次，并且减短或者加长感光时间（从5秒到30分钟）以期达到理想结果。
注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。而不是标本来源来洗择。因为二抗是与一抗反应而不是与标本反应。
2. western blotting ECL发光法操作比较烦琐，但其敏感性较高，对于低丰度蛋白也能显示出结果。
3.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可增加抗体浓度，延长抗体孵育时间，加长感光时间。
4. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml的双蒸水溶解，用盐酸调PH到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水 加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）
如果实验结果无条带，可将稀释过的一抗再作1倍，10倍，50倍稀释，直接点到膜上（10ul），封闭，加二抗，最后显色，如果能显出斑点来，则证明显色系统没有问题，可从蛋白裂解和一抗上面找原因；如果无法显出，请先从显色系统寻找原因。

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