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报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型
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威斯腾生物
报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型
一、报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型:指在目的基因的位置引入报告基因(如EGFP、mRFP、mCherry、mYFP或LacZ等)或标记基因的小鼠模型,通过报告基因的表达监控目的基因启动子的转录活性、监控目的蛋白的表达定位及细胞转运。
2.报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型优势与不足:
优势:报告基因小鼠模型是一种在体研究启动子转录活性、蛋白表达定位或细胞转运的有力工具。
不足:在目的基因的启动子后、编码序列前引入报告基因的同时会敲除目的基因。如果不想敲除目的基因,可以使用IRES或2A技术,共表达目的基因和报告基因。
三、报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型原理
如果使用报告基因小鼠是为了监控基因启动子的转录活性,可以用报告基因的编码序列(如EGFP)替换目的基因的编码序列,在引入报告基因的同时敲除目的基因。
如果使用报告基因小鼠是为了监控蛋白表达、定位及细胞转运,一种实现方法就是在目的基因的蛋白编码区末端加入一个短肽编码序列来标记蛋白。通过短肽抗体对短肽的识别,间接研究目的蛋白的表达及功能,这一方法尤其适用于没有抗体的目的蛋白。
四、报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型应用
1、基因启动子的转录活性研究;2、在体监控蛋白的表达、定位或细胞转运;3药物的靶标确认;4、药物的临床前评价。
五、服务流程:
1、方案评估
2、方案报价
3、确定服务内容
4、签订服务合同
5、进行实验,定期向客户反馈
6、整理实验报告
7、完成合同内容
8、售后服务
9、合作完成
更多实验技术服务请见中心网站,或来电询洽!
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文献和实验还有没有可能存在其他作用方式 不知道您想问什么. 既然reporter的结果出来了的话,,直接作用是应该存在的,可以像前面的战友说的那样用Chip assay来做个直接结合实验就可以.但是话说回来,这个在一些细胞上已经做出来了的(您在pubmed输入 nf kappa b il 8),不知道您的创新点是在哪里 或者就是间接途径(或者就是远亲关系),NFkappa转录了其他的转录因子X,然后这个转录因子X再结合于IL
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的预测靶点范围,即在体内和体外 miR-31 上调后,其表达显著下降。其中,昼夜节律基因 Clock 已经被报道是 HFSC 细胞命运决定的调控因子。接下来,通过荧光素酶报告基因检测(Luciferase reporter assays)和 Western Blot,他们证实了 Clock 为 miR-31 的靶点以及其在 miR-31 上调时出现显著下调,但这种下调在条件性敲除小鼠中并不存在。图片来源:Nature Aging最后,借助小鼠体内实验模型,他们发现,通过敲降上皮细胞中的 Clock
表达 体内基因表达模式方面的研究。在药物研发领域,科学家通过可发光转基因动物(例如:大鼠或小鼠基因组中整合了修饰的内源基因和BL报告基因)作为人类疾病的模式动物进行目标确认的研究。[35] 例如:目前已经建立了一个转基因小鼠模型,可以监测编码人细胞色素P450 3A4(CYP3A4)基因的体内转录调控,人细胞色素P450 3A4在药物代谢方面起着重要作用。[36] 传染性疾病 疾病的进程和治疗剂的功效可以通过对小鼠注射BL标记进行评估。例如注射经过修饰的病原微生物,然后对透过动物组织的光进行成像
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