条件性基因敲除小鼠（威斯腾--原代培养、细胞敲除、模式动物一

 

一、介绍：
组织特异性的条件性基因敲除小鼠模型指通过基因敲除技术，使目的基因在特定组织或细胞中不表达，而在其他组织或细胞中正常表达的动物模型。
二、优势与不足：
优势：这种打靶策略能避免全基因敲除可能引起的胚胎致死及表型复杂等问题，同时因为目的基因只在特定组织中失活，能用于研究该基因在特定组织中的功能，而该基因在其他组织中仍能正常表达；
不足：设计时需要对基因进行全面的分析，避免基因敲除导致内源性基因的表达下调或截短蛋白的表达。得到的种系遗传小鼠模型需要与组织特异性表达重组酶的小鼠交配才能得到组织特异性敲除小鼠，使后续繁殖时间比全基因敲除小鼠模型至少多交配一代。
三、条件性基因敲除操作原理：
主要是通过染色体位点特异性重组酶系统来实现的，如Cre-LoxP系统、 FLP-Frt系统和Dre-Rox系统等，其中最常用的是Cre-LoxP系统。这一系统是在待敲除的一段目的基因序列的两端各放置一个LoxP序列，得到Floxed（Flanked by loxP)小鼠。该floxed小鼠在与表达Cre重组酶的小鼠杂交前，目的基因表达完全正常，从而能够避免全基因敲除可能出现的胚胎致死。而当该floxed小鼠与组织特异性表达Cre重组酶的小鼠杂交后，即可获得目的基因在特定的组织或细胞中被敲除的小鼠，而该基因在其它组织或细胞中表达正常。
floxed小鼠如果与不同的Cre重组酶小鼠杂交，可以使目的基因的敲除发生在小鼠的任一组织或细胞中。此外，如果与控制Cre重组酶表达的诱导系统相结合，还可以使目的基因的敲除发生在小鼠发育的任一阶段，实现对目的基因表达的时空两方面调控。

四、应用
具有胚胎致死性目的基因的研究；
目的基因在特定组织中的生理或病理功能研究；
药物的靶标确认；
药物的毒理学研究

五、服务流程：


威斯腾生物服务项目

疾病	方法	动物	模型成功率	操作难度	耗时程度
帕金森疾病	6-OHDA脑立体定位注射	Rat	70%~80%	简单	比较耗时
	MPTP、IP或SC注射（急性or慢性）	Mouse	70%	简单	快速
抑郁症	禁食、禁水、夹尾、冰水等慢性不可知刺激	Rat	80%	简单	非常耗时
	利血平药物注射或者悬尾和强迫游泳	Mouse	60%	简单	非常耗时
脊髓损伤	脊髓半切、全断、牵张、挤压、打击等	Rat	80%	普通	非常耗时
脑外损伤	颅脑损伤仪打击致损	Rat	80%	普通	比较耗时
坐骨神经损伤 （周围神经损伤）	切断或者夹闭神经（手术）	Rat	90%	简单	一般
心肌缺血	心脏冠状动脉左前降支结扎	Rat	60%~70%	较难	非常耗时
心力衰竭	腹主动脉缩窄手术致心力衰竭	Rat	90%	简单	快速
肺动脉高压	手术分流术和MCT IP或SC注射	Rat	80%	普通	一般
高血压	单肾单夹肾血管或者两肾一夹型肾血管	Rat	80%	简单	快速
粥样动脉硬化	高脂饮食+VD3喂养	Rat/Mouse	50%	简单	非常耗时
大脑中动脉阻塞（MCAO）	线栓法制备	Rat	70%	普通	比较耗时
慢性支气管炎	烟熏	Rat	80%	简单	耗时
过敏性哮喘	OVA+氢氧化铝致敏	Rat/Mouse	80%	普通	耗时
肺炎模型	鲍曼不动杆菌气道滴注	Rat/Mouse	90%	简单	快速
肝炎—肝硬化—肝癌	DEN诱导	Rat	80%	简单	比较耗时
肝纤维化	CCL4诱导	Rat	80%	简单	耗时
胆结石模型	喂养致石饲料	Mouse	90%	简单	一般
急性胰腺炎	牛黄胆酸钠胰胆管注射	Rat	90%	普通	快速
急性肾衰竭	顺铂尾静脉注射/肾动脉缺血	Rat	80%	普通	一般
体内血栓	手术或者药物诱导	Mouse	60-70%	普通	比较耗时
关节炎模型	Ⅱ型胶原+佐剂诱导	Rat/Mouse	90%	简单	一般
Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病	STZ或增加高脂饲料喂养药物诱导	Rat/Mouse	80%	简单	比较耗时
荷瘤鼠/裸鼠成瘤	皮下成瘤	BALB/cA-nu mice	90%	简单	一般
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