CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒库存

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北京百奥莱博专业生产供应CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒库存，我公司销售全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

编号：YT157
规格：2000次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒是我公司研发的基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。
基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA-SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式为C29H19NO11，分子量为557.47，CAS number为150347-59-4。CFDA SE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后，分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。
使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。
目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。
CFDA SE标记细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。
CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。
CFDA SE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞，最佳标记时间需自行摸索。
本试剂盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE进行细胞标记时所需的配套试剂。
如果每个检测样品的荧光探针标记体积为1ml，本试剂盒共可以检测2000个样品。
保存条件：
-20℃保存，半年有效。其中CFDA SE需避光保存。
注意事项：
CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，最长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

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·糖原(核酸沉淀用)
编号：YT011
英文名称：Glycogen
规格：500微升

本产品为分子生物学级Glycogen(糖原)，不含DNase，不含RNase，可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂(used as a carrier for the precipitation of DNA or RNA)。
作为DNA或RNA的辅助沉淀剂，大多数情况下glycogen比tRNA或超声处理过的DNA效果更好。由于glycogen中不含DNA和RNA，因此用glycogen作为辅助沉淀剂沉淀下来的核酸更适合于后续的PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。而tRNA或超声处理过的DNA作为辅助沉淀剂有时会干扰PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。
据文献报道，连接反应产物用glycogen沉淀后对于后续的细菌转化没有干扰，0.001mg/ml glycogen不会抑制TdT，浓度不大于2mg/ml的glycogen不会影响反转录酶的活力，0.02mg/ml glycogen不会抑制T4 RNA ligase。Glycogen会干扰DNA和蛋白的相互作用。
通常1微升Glycogen (20mg/ml)即可把少至皮克(pg)级的DNA或RNA从1毫升的溶液体系中沉淀出来。每个包装至少足够沉淀500个常规量的DNA或RNA样品。
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：
通常每个样品加入1微升Glycogen(20mg/ml)即可，对于已知糖原可能对后续反应有干扰的情况，可以适当减少糖原用量，或使用tRNA等作为辅助沉淀剂。

使用说明：
1.在待沉淀的DNA或RNA样品中加入1微升Glycogen(20mg/ml)，混匀。对于特定的实验操作，糖原的用量可以参考文献或特定的操作说明进行。
2.根据实验需要采用乙醇或其它方法沉淀DNA或RNA。
3.加入乙醇等沉淀试剂，混匀，12,000g左右离心10分钟，即可得到核酸和glycogen的共沉淀物。如果要求尽量沉淀完全，在加入乙醇等沉淀试剂并混匀后，可以-20℃或-80℃冻存数小时或过夜后再离心。


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·总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)
编号：YT312
英文名称：Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method
规格：100次

总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma(FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。
活性氧(Reactive oxygen species,ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。
机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。
植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。其中S0116-2 TPTZ溶液，S0116-3 检测缓冲液和S0116-5 Trolox溶液(10mM)需避光保存。
注意事项：
在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂会对本试剂盒的检测产生干扰，需尽量避免。
如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐或亚铁盐，会干扰测定。但血浆、血清、细胞或组织裂解液等样品中含有的微量的铁盐或亚铁盐不会干扰测定。
样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质，也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。
测定时需可以测定A593的酶标仪一台(测585-605nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。
TPTZ对人体有刺激性，请注意适当防护。



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·Hemoglobin(NO清除剂)
编号：YT284
规格：1g

本Hemoglobin纯化自Bovine Erythrocytes。Hemoglobin是氧的转运体(oxygen transporter)和一氧化氮的清除剂(nitric oxide scavenger)。Hemoglobin极易和空气中的氧气结合，因此本试剂主要为氧化态的Hemoglobin。
Hemoglobin为红棕色粉末，分子量约64,500，SDS-PAGE分析纯度大于95%。
溶解于水，可以配制成20mg/ml的暗红棕色溶液。
保存条件：
-20℃保存，两年有效。
注意事项：
如果配制成水溶液，分装后-20℃保存，半年有效。

使用说明：
1. Hemoglobin储备液的配制：称取少量Hemoglobin，推荐使用Milli-Q级纯水溶解Hemoglobin，使浓度为20mg/ml。
2. Hemoglobin的工作浓度通常为10-20μM。其最佳工作浓度需根据具体的实验，自行摸索。

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