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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cell counting KIT-8
- 库存:
611
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖
编号:QN1293
品牌:百奥莱博
英文名:Cell counting KIT-8
产地:国产|进口
规格:100T|500T|500T*10
本试剂盒为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定OD 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
活力计算:.
细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[ A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
储存条件:4℃,有效期一年
QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·菠萝蛋白酶
编号:QN0509
英文名称:Bromelain
规格:50g|250g
别名:菠萝酶;菠萝蛋白酶;菠罗蛋白酶;菠萝蛋白酶
CAS号:9001-00-7
酶活:600u/mg
储存条件:2~8℃
·D-赖*酸
编号:QN0278
英文名称:D-Lysine
规格:1g
别名:D-赖*酸;D-赖*酸碱
CAS号:923-27-3
分子式:C6H14N2O2
分子量:146.19
储存条件:−20℃
·L-谷*酸*
编号:QN0355
英文名称:L-Glutamicacidsodiu*(代"m")salt
规格:100g
本品仅可用作生化试剂,谷*酸*用作化学镀络合剂。
别名:L-谷*酸一*盐;麸*酸*;L-*基戊二酸*;谷*酸*
CAS号:6106-04-3
分子式:C5H8NO4.Na
分子量:187.13
储存条件:阴凉处保存
性状:无色至白色棱柱状结晶或白色结晶性粉末。
·肾上腺酮
编号:QN0207
英文名称:Corticosterone
规格:100mg
别名:皮质甾酮
CAS号:50-22-6
分子式:C21H30O4
分子量:346.46
储存条件:RT
纯度:≥98%
·总RNA提取试剂盒
编号:QN0926
英文名称:Total RNA Extraction Kit
规格:50T|100T
操作步骤:
1. 样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2. 将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2~8℃ 12000rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2~8℃ 12000 rpm离心2min,弃废液。
6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。
注意事项:
1,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
储存条件:2~8℃
QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖关键词:Cell counting KIT-8,CCK-8试剂盒,QN1293
ARB13035 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA检测服务 Mouse follistatin,fs ELISA KIT
PP0601 加热型快速考马斯亮兰染色液
ARB12498 大鼠神经球蛋白(NGB)Elisa分析 Rat neuroglobin,ngb ELISA KIT
BL0864 羊抗人C3免疫血清
ARB10469 人白三烯E4(LTE4)酶联免疫定量检测 Human leukotriene e4,lt-e4 ELISA KIT
F010111 小鼠抗玉米赤霉烯酮抗体 Monoclonal Mouse Anti-Zearalenone
0030011 冻干粉兔血浆
ARB13997 猪瘦素(LEP)酶免分析 Porcine leptin,lep ELISA KIT
BTN130536 抑*肽酶溶液 Bestatin Solution
E0616 抗凝裂解大牛血 100ml/500ml
ARB12414 大鼠细胞色素P450(CYP450)酶联免疫定量检测 Rat cytochrome p450,cyp450 ELISA KIT
BL0968 封闭用驴血清(冻干粉) 10ml
QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖关键词:Cell counting KIT-8,CCK-8试剂盒,QN1293
·抑肽酶
编号:QN0450
英文名称:Aprotinin from bovine lung
规格:2mg|5mg
抑肽酶广泛应用于各种生物学实验(如各种蛋白提取过程),在抑制蛋白酶分解蛋白过程中起到了重要作用。抑肽酶抑制胰蛋白酶、纤溶酶、血浆及组织中血管舒缓素。丝*酸活性的蛋白酶如纤溶酶及血浆血管舒缓素都起关键作用。抑肽酶通过抑制酶上的丝*酸活性部分,但是与不同的蛋白酶结合,抑制效果会略有不同。与胰蛋白酶的结合最牢固,而与人体纤溶酶的结合牢固度很低,且与人血浆血管舒缓素结合的复合物相当不牢固。抑肽酶的抗纤溶作用不但能保护直接的底物(纤维蛋白)不被纤溶酶降解,并保护着血浆中的纤维蛋白原及血清中的α2-球蛋白等。
别名:抑肽酶
CAS号:9087-70-1
分子式:C284H432N84O79S7
分子量:6511.51
储存条件:2~8℃
性状:白色粉末
来源:牛肺
活性(KIU/mg):>4500
工作浓度:0.6-2ug /ml
使用方法:可以用PBS配成10mg/ml的储存液,使用时可以5000-15000倍稀释(终浓度为0.6-2ug/ml)。分装冻存于-20℃。
我公司生产供应销*(代"售")的细胞凋亡与增殖产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购QN1293型CCK-8试剂盒哪里卖。
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文献和实验药物的培液,直接加MTT即可。如何清除上清百家争鸣:1.加DMSO前要把液体吸掉,但培养液里的紫色结晶可能会吸去,可在这之前先用平板离心机离心96孔板,2000r,5分钟,然后吸掉上清(如果是悬浮细胞,则推荐此法,悬浮细胞要离心2500rpm×10min.且其做MTT最好用圆底型96孔板,清除上清时注意不要把下面的结晶颗粒吸掉,建议各孔吸弃150-160ul即可)。2.我每次将MTT加入后,再孵育四个小时,然后用离心机离心1000G,5min。但是用*小心地吸上清,还是会将一小部分蓝色结晶吸出
五、如何清除上清 百家争鸣: 1. 加DMSO前要把液体吸掉,但培养液里的紫色结晶可能会吸去,可在这之前先用平板离心机离心96孔板,2 000 r,5分钟,然后吸掉上清(如果是悬浮细胞,则推荐此法,悬浮细胞要离心2 500 rpm×10 min,且其做MTT最好用圆底型96孔板,清除上清时注意不要把下面的结晶颗粒吸掉,建议各孔吸弃150-160 ul即可)。 2. 我每次将MTT加入后,再孵育四个小时,然后用离心机离心1000 G
2500 rpm×10 min,且其做MTT最好用圆底型96孔板,清除上清时注意不要把下面的结晶颗粒吸掉,建议各孔吸弃150-160 ul即可)。 2.我每次将MTT加入后,再孵育四个小时,然后用离心机离心1 000G,5 min。但是用枪小心地吸上清,还是会将一小部分蓝色结晶吸出。所以还是建议翻转倒扣的方法吧! 3.另外,可以直接将板翻转倒扣(垫几层滤纸)2-3次,比用“吸”的办法更不容易使细胞脱离出来。可以轻拍,或者倾斜一点帮助吸液,发现紫色结晶几乎没有肉眼可见的掉脱,但前提是你本身细胞
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