生物素随机引物DNA标记试剂盒优惠价

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北京百奥莱博专业生产供应生物素随机引物DNA标记试剂盒优惠价，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

生物素随机引物DNA标记试剂盒优惠价
编号：YT031
规格：10次
产地：国产|进口
英文名：Biotin Random Prime DNA Labeling Kit
品牌：百奥莱博

生物素随机引物DNA标记试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。
在Klenow酶(Klenow fragment,3"-5"exo-)催化下，通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中，这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中，一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下，通过随机引物标记反应，最后可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针，可多达1-15倍左右。
本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记，包括DNA*(代"片")断、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DNA*(代"片")断应不小于100bp，小于100bp的DNA模板可以使用我公司生产的生物素3"末端DNA标记试剂盒(D3106)进行DNA探针标记。
用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng，推荐的模板用量为100ng-1μg。
本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA，可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。
生物素标记DNA可以使用我公司生产的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(D3308)或其它适当试剂盒进行检测。
本试剂盒可以用于10个标记反应。
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
需自备用于探针标记效率检测的相关试剂。

使用说明：
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板，再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water，至总体积为34μl。说明：通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应。
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X)，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟，或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃，99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量，因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液，混匀，终止标记反应。至此标记反应已经全部完成，标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。
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·EMSA探针-HIF-1α(10μM)
编号：YT224
规格：30μl

EMSA探针－HIF-1α是用于EMSA(也称gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的HIF-1α结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。
HIF-1α consensus oligo的序列如下：
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记，也可以用于生物素标记。
一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应，每次标记的探针可以测定约100个样品；或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition)，可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。



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·TUNEL检测阳性对照制备试剂盒
编号：YT134
规格：10次

TUNEL检测阳性对照制备试剂盒可以用于TUNEL检测阳性对照的制备，制备后的阳性对照可以用于一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒的荧光，也可以用于显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒的显色检测。
DNase I可以剪切基因组DNA，使基因组DNA产生片段化(fragmentation)。基因组被片段化的细胞在用TUNEL法检查时会呈阳性染色。
本试剂盒足够制备10个阳性对照。
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
需自备用于TUNEL检测的组织切片、或培养细胞的片子。需自备TUNEL检测试剂盒。

使用说明：
1. 参考TUNEL检测试剂盒的相关说明，把培养细胞或组织切片处理至进行荧光标记或生物素标记之前的一个步骤。
2. 用双蒸水或MilliQ级纯水稀释适量Reaction Buffer至1X。
3. 在样品上滴加50-100微升1X Reaction Buffer，室温孵育5分钟。
4. 离心沉淀DNase I。在100微升1X Reaction Buffer中精确加入1微升DNase I，混匀，滴加到样品上。
5. 室温(25℃)孵育10分钟。如果室温稍低于25℃，可以适当延长孵育时间；反之如果室温稍高于25℃，可以适当缩短孵育时间。
6. 用PBS或HBSS洗涤3次。
7. 随后参考TUNEL检测试剂盒进行荧光标记或生物素标记。


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·胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒
编号：YT368
英文名称：Placental Alkaline Phosphatase Assay Kit
规格：100次

胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒是一种用于快速、便捷地检测血清、血浆、尿液或细胞和组织的裂解液或匀浆液等样品中内源性的胎盘碱性磷酸酶活性的试剂盒。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可以在碱性条件下，催化磷酸酯键的水解。哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。
胎盘碱性磷酸酶是一种膜结合的糖基化的碱性磷酸酶，具有较高的热稳定性，主要分布在胎盘。血液中胎盘碱性磷酸酶的升高被认为是肿瘤的特征性指标，特别是精原细胞癌和卵巢癌的重要分子标记。
本试剂盒可以检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液或纯化的酶样品等中的胎盘碱性磷酸酶活性。
本试剂盒一方面利用了胎盘碱性磷酸酶的热稳定性，加热处理后去除了绝大部分其它碱性磷酸酶，另一方面，优化了胎盘碱性磷酸酶的检测条件，使检测体系更适合于胎盘碱性磷酸酶的检测。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物，在碱性条件下，可在胎盘碱性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下，呈黄色产物，可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深，说明胎盘碱性磷酸酶检活性越高，反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出胎盘碱性磷酸酶活性水平。
包括标准品和空白对照，本试剂盒共可进行100个样品的检测。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。显色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事项：
如果希望进行酶活性的绝对定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间，以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高，则可以预先适当稀释样品。
样品溶液中须避免出现EDTA、氟离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶的抑制剂。
检测缓冲液和p-nitrophenol溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性，请小心操作。

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