随机引物法DNA探针标记试剂盒

随机引物法DNA探针标记试剂盒产品及特点
本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即 用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结 合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸 三步组成本产品在上述原理的基础上本产品的特点是：
1. 使用十聚引物，复性效率比六聚引物更高。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3. 快速，最快1小时即可完成标记反应。
4. 所得DNA探针比活性高(对同位素可以达到109 cpm/ μg DNA)，检测灵敏度 高。
5. 所需模板DNA量少（只需要10 ng以上即可），DNA可以是各种形状（线状和 环状）的、也可以是单链或双链的，长度在100 bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400 nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂 交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 三种标记选择，其中90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标 记，但需自备标记底物；90603B和90603C可分别用于生物素和标记。
随机引物法DNA探针标记试剂盒使用及效果
将10ng-3 μg的DNA模板在水（终体积不超过14 μL）中变性5分钟后放冰上， 加入2 μL 10×标记缓冲液、1 μL Klenow exo-酶、1 μL 标记核苷酸（A型中不提 供），混合后37℃保温1-20小时，加入1 μL自备的0.5M EDTA终止反应。所得标 记探针可以直接使用或者放-20℃长期保存。