50ml离心管，无盖，灭菌，25/500

人单核细胞和中性粒细胞

M199 + 35g NaHCO3 + 25mM Hepes + 5 mM glutamine + 50 ug/ml Gentamycin.1M Hepes: 119.1 g Hepes + 500 ml dH2 O.Media A: 1X HBSS (10X:50ml) + 10 mM Hepes (1M: 5 ml) + 5 mM EDTA (0.5M: 5ml) + 2.5 % FBS (12.5 ml) in 500 ml.Media B: RPMI1640 470 ml + Gent

经典补体结合反应（以马鼻疽补反为例）

一、预备试验1、绵羊红细胞悬浮液的制备 通常用公绵羊红细胞，将绵羊血液采集于带有玻璃珠的无菌容器中，充分振摇，使脱去纤维，此时血液失去凝固性，称脱纤血。亦可用阿氏液保存血液，阿氏液配方如下：葡萄糖24.60g氯化钠5.04g柠檬酸钠（含2个分子结晶水）9.60g蒸馏水1200ml溶液配好后，高压（10磅）灭菌10min，也可通过蔡氏滤器灭菌。溶液盛于瓶内，将绵羊血直接采入瓶内，血量应大致与阿氏液量相等。摇匀，置冰箱中保存，可保存3周左右。用时将血液移入离心管内，加3～5倍量生理盐水，离心

重组腺病毒构建、扩增及纯化

培养基中，37℃振摇过夜。 （2）接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基，37℃振摇，至OD600 达到0.4. （3）迅速将培养物置于冰浴中30min，至充分冷却。 （4）将菌液转移至预冷的离心管中，4℃下以2500r/min离心15 min，弃培养液，回收细胞。 （5）以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀，低温离心，共两次。 （6）加约1ml（适量）预冷的10%甘油重悬沉淀，稀释悬液100倍，测量OD600,至稀释浓度为2-3×1010个细胞/ ml （1.0 OD600约