内源性生物素清除液（1×）

如何减少免疫组化的背景染色？

液中 37℃ 温浴 10 分种； 5、PBS 液冲洗，3 分钟×3； 6、每张切片加 1 滴（50?l）过氧化酶阻断溶液，室温孵育 15 分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性； 7、PBS 液冲洗，3 分钟×3； 8、枸橼酸盐修复液冲洗，3 分种×2； 9、微波修复抗原（枸橼酸盐修复液微波高火加热至沸腾，放入切片，中低火维持沸腾 8-10 分种，自然冷却至室温）； 10、PBS 液冲洗，3 分钟×3； 11、滴加 1 滴（50 ul）正常非免疫动物血清，室温孵育 20

IHC原理、操作及注意事项

决定簇。通过抗原修复，使得细胞内抗原决定族重新暴露，提高抗原检测率。常用的修复方法从强到弱一般分为三种，高压加热修复、微波修复、胰酶修复。其中高压加热修复这一方法简便易操作，效果也更好。使用高压加热修复对于修复温度和时间的把握十分重要，温度越高修复时间越短，温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却，让蛋白自然复性。其次，尽量使用过量的抗原修复液，防止高温液体挥发干涸，对切片造成不可逆的损伤。 灭活内源性过氧化物酶和生物素 在传统的 ABC 法和 SP 法中，免疫组化反应容易受到内源性过氧化物酶和生物素

ELISA 实验样本处理方法

，小心收集上清液（血清），立即进行测定。建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存，避免反复冻融。 在收集血液样本的过程中应避免溶血，因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质，这种情况下，ELISA实验中将会出现非特异性显色反应，导致检测结果不准确。另外，样本还应避免细菌污染，因为细菌可能含有内源性HRP，也会导致检测结果不准确。 血浆 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本，采集后30分钟内，2-8℃下以1000×g离心15分钟，小心收集上清液（血浆）。建议在-20℃或-80