浓缩型免疫组化试剂盒 SABC-DyLight 488(PO

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名称：浓缩型免疫组化试剂盒 SABC-DyLight 488(POD)(兔IgG)供应
品牌：百奥莱博
规格：1盒
产地：国产|进口
产品规格：1KIT
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
工作原理：
SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素(SABC-DyLight 488+POD)。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
试剂盒内容：
1．正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)1ml/2ml/5ml
2．生物素化山羊抗兔 IgG(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
3．SABC-DyLight 488(参考效价 1：200-800)0.1ml/0.2ml/0.5ml
4．SABC-POD(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
另有四个滴瓶供稀释试剂用。
石蜡片染色步骤：
1．石蜡切片，常规脱蜡至水。
2．3%H2O2 去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗,5分钟×3次。
3．根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4．封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5．滴加一抗(兔 IgG)，37℃孵育1-2 小时或 4℃过夜。PBS 冲洗，5分钟×3次。
6．滴加生物素化山羊抗兔 IgG，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
7．滴加 SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或 SABC-POD(参考效价 1：100)，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
8．显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选 DAB。自来水充分冲洗。
9．根据需要进行苏木素复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂封片。
10．结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
建议：
1．热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2．酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋白酶、胃蛋白酶消化组织。

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