pGEM® -T 载体系统

说明：pGEM® -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM®-T 载体是通过EcoRV 酶切pGEM®-5Zf(+) 载体，并在两个3' 末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM®-T 载体插入位点3'-T 突出端可极大提高 PCR 产物的连接效率，因为3'-T 突出端可以防止载体的自身环化，并且为某些热稳定性聚合酶产生的PCR 产物提供一个匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3' 端加上一个脱氧腺苷酸。

pGEM® -T 载体多克隆区T 突出端的两侧均有BstZI 酶切位点，使用BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM® -T 载体系统II 除了pGEM® -T 载体系统I 所有成分外，还包括JM109 感受态细胞。

特点

• 快速连接：使用2X 快速连接缓冲液(2X Rapid Ligation Buffer) 可以使连接反应在室温下1 小时内完成。

• 蓝 / 白筛选：pGEM® -T 载体包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶启动子，分别位于β 半乳糖苷酶的α 肽编码区内多克隆位点的两侧。 α 肽的插入失活允许在指示培养基上用颜色直接筛选重组克隆。

• f1 复制起始位点：可用于制备单链DNA。