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冷藏
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长期
- 库存:
355
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售JM109受体菌厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
JM109受体菌厂家
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:XH046
规格:1ml
基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,e14-(mcrA-),supE44,relA1,△(lac-proAB)/F’ [traD36,proAB+,lac Iq,lacZ△M15]
细胞种类
α-互补性选择宿主 E.coli JM109
E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 Phage载体进行转染时,由载体DNA产生的LacZα多肽和由JM109 F’编码的lacZ△M15产生的ω Fragment结合,表现出β-半乳糖苷酶活性(α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。携带有F’质粒的E.coli Competent Cells JM109,除可用于制作基因文库、进行亚克隆等之外,也可作为M13 phage载体DNA的宿主菌,制备单链DNA。
保存:所有受体菌均为甘油保存,-70℃可长期保存,-20℃可保存一年。
JM109受体菌厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
酚酞单磷酸环己胺盐 Besmarck brown Y 14815-59-9
F050303 人IgM抗体 Human IgM
F030109 HRP标记羊抗乙肝e抗原抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-HBeAg
BTN90805 即用型PCR试剂盒3.0 Instant PCR Kit 3.0
BL1269 0.01M PBS(干粉) PH7.2-7.4
BTN100301 秋水仙素溶液 Colchicine Solution
虫胶 Sarcosine Oxidase 9000-59-3
ARB13056 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)elisa测定使用说明书 Mouse transferrin receptor,tfr ELISA KIT
普鲁士蓝 Azodicarbonamide 14038-43-8
BTN131053 蛋白级DTT DTT,Protein Grade
BL1403 固相RNase清除剂
C1501 狗血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
1239-45-8 Ethidium Brmide 溴化乙锭
5-肌苷二磷酸三钠盐 Oligo dt Cellulose 71672-86-1
F030306 胶体金标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*GOLD
藜芦醛 6-PG-Ba 120-14-9
BTN60201 非酶DNA清除剂 DNA Erasol
JM109受体菌厂家关键词:JM109受体菌,XH046,百奥莱博
PY04-017 新鲜番茄汁 5ml×10支 每支添加于95ml改良番茄汁琼脂培养基基础中制成改良番茄汁琼脂培养基,用于乳酸菌菌落总数的测定
137-08-6 D-泛酸钙 D-Pantothenic acid(Vitamin B5)
BTN80817 mRNA提取试剂盒 mRNA Isolation Kit
PL1401 大型/大量质粒提取试剂盒(溶液型,转染级)
PC4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶)
2-氯-1-甲基*(代"碘")代吡啶 BCP 14338-32-0
BFD077 犬瘟热抗原快速检测卡
琼脂糖蛋白A VA
BTN131027 胃蛋白酶 Pepsin
ARB10697 人肌球蛋白重链(MHC)Elisa分析 Human myosin heavy chain,mhc ELISA KIT
HC0192 记号笔(红色) 油性
ARB13432 鸡心肌肌钙蛋白I(cTNI)酶联免疫定量检测 Chicken cardiac troponin i ,ctniELISA KIT
PY02-157 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 250克
JM109受体菌厂家关键词:JM109受体菌,XH046,百奥莱博
·去内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:XH012
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来,增加内毒素清步骤,提取的质粒可用于一些要求更高的实验,如转染。
本试剂盒(以200T为例)可以用200小次或者10大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
4.内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象,为正常,在2-8℃放置一段时间混浊会消失。
5.本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒,因而相对于常规提取,本试剂盒得率偏低。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入200ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入200ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入200ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊,冰浴2min至溶液变清亮。
8.37℃水浴2min,不时振荡,溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min,溶液应分为两相,上层水相含质粒DNA,下层油状相含内毒素。
9.将含质粒DNA的上层水相转移至新管,弃下层油状相,注意不要吸入油状相。重复抽提三次,即重复步骤7-9三次。
10.在得到的上清中加入等体积的结合液,再加入等体积的无水乙醇,混匀(上清:结合液:无水乙醇=1:1:1)
11.玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
12.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
13.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
14.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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文献和实验基因克隆的四大要素(Four Elements for Gene Cloning)
一、受体细胞 :受体细胞的选择是否合适将关系到能否表达,特别是高效表达。首先要注意不同的表达载体与受体细胞的关系,即原核表达载体适合原核细胞,真核载体则适合真核细胞,而农杆菌仅适用于植物细胞。即使大肠杆菌质粒,也应注意选择合适的菌种。例如,当用含有T7 噬菌体启动子的载体表达外源基因时,由于T7 启动子只能被其本身的RNA 聚合酶(T7 RNA 聚合酶)所识别,所以必须使用具有产生T7 RNA 聚合酶能力的受体菌,如:BL21(DE3)、JM109(DE3)。对于一些缺失β-D-半乳糖酶氨
/KCl法制备的感受态细胞转化效率较高,但CaCl2 法简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备出的感受态细胞暂时不用时,可加入无菌甘油至总体积15%,于-70℃保存半年之久,因此CaCl2法为使用更广泛。准备: 1、配制0.05mol/L CaCl2 -15%甘油混合溶液,高温高压灭菌;注:CaCl2 必须为分析纯以上。2、实验中所需的所有试管、培养瓶、离心管等均要用去离子水彻底清洗干净,高温高压灭菌;注:最好有制备感受态细菌专用的一套实验器材。3、受体菌的培养:从非选择性LB
步骤 实验原理 1 挑取一个JM109单菌落于3ml LB(无抗生素)培养基中,37℃,180rpm培养过夜。 让菌复苏,进入对数期的早中期。此时更容易制得感受态细胞。 2 取0.4mL过夜培养物加入到40mL LB(无抗生素)培养基中,37℃250rpm大约
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