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-20℃
- 保质期:
长期
- 库存:
898
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
15KU|3KU|1500U
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货SfiI限制性内切酶优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
编号:R0123L
规格:15KU|3KU|1500U
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,50℃。
浓度:
20,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对 dcm 和哺乳动物 CpG甲基化敏感。
注意事项:
Sfil的切割需要两个拷贝数的识别位点。
欲咨询购买北京现货SfiI限制性内切酶优惠价,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·T4 多聚核苷酸激酶(3´磷酸酶活性缺失)
编号:M0236L
规格:1KU|200U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到最佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
浓度:
10,000 units/ml。
北京现货SfiI限制性内切酶优惠价关键词:SfiI限制性内切酶,R0123L,美国
·SapI限制性内切酶
编号:R0569L
规格:1250U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
·Hpy166II限制性内切酶
编号:R0616L
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
·蓝色预染蛋白 Standard,宽范围 (11–190 kDa)
编号:P7706L
规格:500gel lanes|100gel lanes|50gel lanes
概述:
我公司提供一系列未预染、预染和彩色预染(有两种预染颜色的条带方便辨认)的高纯度的蛋白 marker 和 ladder。蛋白标准分子量范围覆盖 2.3-250 kDa,可以用作多种表达蛋白的准确分子量评估参照,其条带清晰,间距适当,易于辨认。
浓度:
0.1-0.3 mg/ml。
注意事项:
用于样品分子量精确判断时,请使用 我公司非预染蛋白 Marker,宽范围(P7702)或非预染蛋白Ladder(P7703)。
·T7 DNA 聚合酶
编号:M0274L
规格:1500U|300U
特性:
缺口填充(无链置换活性)
概述:
T7 DNA 聚合酶催化在感染过程中 T7 噬菌体 DNA 的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性:DNA 聚合酶活性和较强的 3´→5´ 核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链 DNA 模板的复制。
来源:
T7 DNA 聚合酶由两个亚基组成:T7 基因 5 蛋白(80 kDa)和 E. coli 硫氧还蛋白(12 kDa)。这两个蛋白分别克隆并在 E. coli 的 T7 表达系统过表达。
反应条件:
1X T7 DNA 聚合酶反应缓冲液
(20 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT,pH 7.5 @25℃)。加入 BSA 和 dNTPs(不随酶提供)。37℃温育。
浓度:
10,000 units/ml。
热失活:
75℃ 20 分钟。
使用注意事项:
该酶具有快速延伸的特性:,故无需长时间温育。T7 DNA 聚合酶不能用于 DNA 测序。
北京现货SfiI限制性内切酶优惠价关键词:SfiI限制性内切酶,R0123L,美国
·BtgI限制性内切酶
编号:R0608L
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
Dsal是Btgl的完全同裂酶。
·HiScribe T7 快速高效 RNA 合成试剂盒
编号:E2050S
规格:50次
特性:
合成长链和短链的 RNA 转录子
掺入修饰的核苷酸
掺入标记的核苷酸
使用帽类似物合成加帽 RNA
概述:
HiScribe T7 快速高效 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种用途的 RNA。预混液剂型便于快速的建立反应,其中 DNase I 和 LiCl 可去除 DNA 模板和快速纯化 RNA。另外,试剂盒可通过插入帽类似物(ARCA)或染料标记的核苷酸来合成帽型 RNA 或染料标记的 RNA。
HiScribe T7 快速高效 RNA 合成试剂盒的优势:
• 预混液形式简化实验流程
• 高效合成反应
• 内含去除模板和 RNA 的纯化试剂
• 每次反应产量高达 180 μg
• 用帽结构类似物进行 RNA 加帽反应,产量高达 30-40 μg
• 少量模板实现高效转录
• 反复冻融仍可保持最佳活性
HiScribe T7 快速高效 RNA 合成试剂盒组份:
– 转录缓冲液(10X)
– T7 RNA 聚合酶混合液
– NTP 缓冲液混合液
– FLuc 对照模板
– 脱氧核糖核酸酶 I(DNase I)
– LiCl 溶液
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文献和实验和耐药性相关突变。 3.4 DNA 甲基化常用检测方法 近年来涌现出很多 DNA 甲基化的检测技术,目前依据对目标 DNA 的预处理手段可将甲基化检测技术分为 3 类: 3.4.1 基于限制性酶切预处理的甲基化检测技术 这种方法是利用甲基化敏感性限制性内切酶对甲基化区域不切割的特性,将 DNA 消化为不同大小的片段后再进行分析。常用的经典酶对是 Hpa II - Msp I(识别序列 CCGG )。随后进行 Southern 或 PCR 扩增分离产物,以明确目标片段的甲基
):5’―GCATGCGCGCGGCCGGGGAGGCC 含Sac∏,SphI,NotI和SfiI位点。 (5) 电泳鉴定扩增产物; (6) 特异限制性内切酶消化,克隆,转化宿主细胞,序列分析,表达研究等。 PCR第一循环中DNA合成是由anchor-poly(dC)引物(ANpolyC) 和5’端引物引导合成。Anchor的加入有两个作用:一是限定3’末端,防止PCR过程中3’末端可能沿同聚物尾不断的延伸;再则增加酶切位点或其他序列信息,利于基因克隆等操作。锚定-PCR对于分析免疫球蛋白、TCR甚至未知序列基因
。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
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