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    亲和纯化/质谱(Affinity purification,AP/MS)

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    亲和纯化/质谱(Affinity purification,AP/MS)
    • ¥1 - 9999
    • 与常规Co-IP实验非常类似,只是亲和纯化法不需要引入抗体。将标签(如SBP)与特定基因融合表达,得到的融合蛋白可以采用链霉亲和素(strep)磁珠来亲和纯化,用生物素洗脱,最终得到蛋白复合物。
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      • 提供商:

        辉骏生物

      • 服务名称:

        亲和纯化/质谱

      • 规格:

        具体价格请咨询:4006991663

      实验目的:寻找靶蛋白的互作蛋白

      亲和纯化/质谱服务简介—辉骏生物:
      与常规Co-IP实验非常类似,只是亲和纯化法不需要引入抗体。将标签(如SBP)与特定基因融合表达,得到的融合蛋白可以采用链霉亲和素(strep)磁珠来亲和纯化,用生物素洗脱,最终得到蛋白复合物。
      实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,再从实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。

      AP/MS技术优势—辉骏生物:
      1、AP/MS得到的互作蛋白是在细胞内与诱饵蛋白结合的,符合体内真实生理情况,得到的结果可信度高。
      2、不像COIP采用抗体拉取蛋白复合物,可以有效的避免抗体的污染;得到的洗脱液可以直接做溶液酶解和质谱,大大减少了跑胶引起的蛋白损失。

      AP/MS服务内容—辉骏生物:
      1.构建带SBP标签的靶基因表达载体;
      2.质粒转染目的细胞,细胞裂解液用strep-HRP做WB检测表达效果(瞬时转染不受基因大小限制,但是受细胞转染率高低的影响;因此难转染细胞可能不适合于该方法,需要进行其他基因导入方法,如慢病毒或腺病毒等);
      3.用strep磁珠进行蛋白复合物的纯化和洗脱;
      4.实验组和对照组的洗脱液分别用胰酶酶解,获得2组多肽混合物;
      5.2组多肽混合物分别做LC-MS/MS,获得蛋白质的定性信息;
      6.实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。

      AP/MS技术流程图—辉骏生物:
       
      服务项目 客户提供 交付产物 实验周期
      AP/MS 1、诱饵基因的名称、序列、物种等相关信息或者诱饵基因的克隆模板
      2、待研究的细胞(保证细胞状态良好,易于用质粒转染)
      1、构建好的真核表达载体
      2、实验组和对照组蛋白的质谱鉴定结果
      3、数据分析结果
      2-2.5个月

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      电话:400-699-1663 / 020-32053431
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    广州辉骏生物科技股份有限公司

    • 联系人:

      刘经理

    • 所在地区:

      广州市萝岗区科学城揽月路3号国际企业孵化器D506

    • 业务范围:

      试剂,技术服务

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      生产厂商,科研机构

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