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    串联亲和纯化/质谱(Tandem affinity purification,TAP/MS)

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    串联亲和纯化/质谱(Tandem affinity purification,TAP/MS)
    • ¥1 - 9999
    • TAP/MS是Co-IP/MS的“近亲”,两者在寻找诱饵蛋白的互作蛋白以及纯化互作蛋白的原理方面非常相似。但是TAP/MS在常规Co-IP的基础上引入了2个标签(锚点strep或SBP,flag),而COIP只有1步纯化。这样TAP/MS中靶蛋白及其复合物经过2个标签的2轮亲和纯化
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      • 提供商:

        辉骏生物

      • 服务名称:

        串联亲和纯化/质谱

      • 规格:

        具体价格请致电:4006991663

      实验目的:寻找靶蛋白的互作蛋白
       
      TAP/MS服务简介-辉骏生物:
      TAP/MS是Co-IP/MS的“近亲”,两者在寻找诱饵蛋白的互作蛋白以及纯化互作蛋白的原理方面非常相似。但是TAP/MS在常规Co-IP的基础上引入了2个标签(锚点strep或SBP,flag),而COIP只有1步纯化。这样TAP/MS中靶蛋白及其复合物经过2个标签的2轮亲和纯化,可以使非特异性蛋白的数量降至较低的水平,将实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,再从实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。
       
      TAP/MS技术优势-辉骏生物:
      1、TAP/MS得到的互作蛋白是在细胞内与诱饵蛋白结合的,符合体内真实生理情况,得到的结果可信度高。
      2、采用两步纯化,可以有效的减少非特异蛋白的结合,并避免因过度冲洗而产生的复合体解离。
       
      TAP/MS服务内容-辉骏生物:
      1、构建Flag-strep(或Flag-SBP)双标签的靶基因表达载体;
      2、包装慢病毒感染目的细胞,做成过表达细胞株,WB检测表达效果(当基因大于2kb时,可能由于出毒效率较低导致病毒滴度不足以感染细胞系,必要时进行质粒转染加药筛选的方法构建稳转细胞系,周期预计延长3-4周);
      3、细胞裂解提取总蛋白,经streptactin 树脂(或strep磁珠)和anti-flag抗体的两步纯化和洗脱;
      4、实验组和对照组的洗脱液分别用胰酶酶解,获得2组多肽混合物;
      5、2组多肽混合物分别做LC-MS/MS,获得蛋白质的定性信息;
      6、实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。
      服务项目 客户提供 交付产物 实验周期
      TAP/MS 1、诱饵基因的名称、序列、物种等相关信息或者诱饵基因的克隆模板

      2、待研究的细胞(保证细胞状态良好)
      1、构建好的慢病毒表达载体

      2、稳转细胞系

      3、实验组和对照组蛋白的质谱鉴定结果

      4、数据分析结果
      2.5-3个月

      更多实验项目请联系我们:
      企业QQ:4006991663
      电话:400-699-1663 / 020-32053431
      邮箱: service@fitgene.com  
      官网:www.fitgene.com
      地址:广州市萝岗区科学城广州国际企业孵化器D506

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    广州辉骏生物科技股份有限公司

    • 联系人:

      刘经理

    • 所在地区:

      广州市萝岗区科学城揽月路3号国际企业孵化器D506

    • 业务范围:

      试剂,技术服务

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      生产厂商,科研机构

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