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串联亲和纯化/质谱(Tandem affinity puri

fication,TAP/MS)
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  • TAP/MS是Co-IP/MS的“近亲”,两者在寻找诱饵蛋白的互作蛋白以及纯化互作蛋白的原理方面非常相似。但是TAP/MS在常规Co-IP的基础上引入了2个标签(锚点strep或SBP,flag),而COIP只有1步纯化。这样TAP/MS中靶蛋白及其复合物经过2个标签的2轮亲和纯化
  • 2026年01月26日
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      串联亲和纯化/质谱(TAP-MS)

    • 提供商

      辉骏生物

    • 规格

      具体价格请联系辉骏生物:4006991663

    串联亲和纯化质谱TAP-MS技术原理

    过表达TST-Flag双标签融合蛋白的细胞,经裂解后先与Streptactin珠子孵育、初次洗涤及洗脱,释放出蛋白复合物;再将此蛋白复合物与anti-Flag珠子结合、再次洗涤,最后的洗脱产物用质谱鉴定未知的互作蛋白。

    串联亲和纯化质谱TAP-MS实验流程

    产品细节图片1


    串联亲和纯化质谱TAP-MS技术应用

    筛选内源性的和诱饵蛋白互作的蛋白

    几种蛋白互作技术特点

    1. GST pulldown:体外表达诱饵蛋白,简单易行,适合无IP级别抗体、又不易转基因的情况;

    2. AP-MS:体内表达带标签的诱饵蛋白,洗脱产物无抗体污染,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;

    3. TAP-MS:体内表达带双标签的诱饵蛋白,两次纯化,非特异结合蛋白更少,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;

    4. CoIP:基本是天然蛋白复合物分离,能比较好的反应体内真实的蛋白互作情况,适合于有非常好的IP级别抗体的情况;

    5. SILAC-IP:可定量鉴定分析体内蛋白复合物,适合于可传代细胞,尤其是易转基因细胞。

    串联亲和纯化质谱TAP-MS服务*辉骏优势

    1. 近十年服务经验,服务客户众多;

    2. 对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻,擅长针对客户具体情况提出合适的方案建议;

    3. 自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行优质的实验路线;

    4. 自有蛋白质组学平台,对微量TAP实验产物的质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的生物信息分析有独到的见解;

    5. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心免疫共沉淀下游实验及投稿。

    串联亲和纯化质谱TAP-MS服务信息

    项目名称

    客户提供

    结果交付

    实验周期

    TAP MS

    细胞样本
    诱饵蛋白编码区基因模板
    实验信息表

    1、诱饵蛋白的双标签慢病毒表达载体
    2、诱饵蛋白WB检测图
    3、质谱检测结果
    4、生物信息学分析结果
    5、实验报告


    14-16周


    串联亲和纯化质谱TAP-MS实验-辉骏生物客户文献


    1. Reinaldo F.M. et al: Destabilizing NEK2 overcomes resistance to proteasome inhibition in multiple myeloma. The Journal of Clinical Investigation.2020 , IF=11.864.

    【研究内容】:每个骨髓瘤患者都有多个亚克隆,具有高或低染色体不稳定性(CIN)特征的多个亚克隆共存会导致异质性和耐药性,导致疾病复发。作者通过串联亲和纯化质谱(TAP-MS)技术,发现了CIN基因NEK2与脱泛素酶USP7结合。该结合阻止了NEK2泛素化并使其稳定。研究发现,使用NEK2或USP7抑制剂进行靶向治疗可能是骨髓瘤最有效的辅助治疗方法。

    使用技术串联亲和纯化质谱(TAP-MS)

    2. Li X.et al: Proteomic analyses reveal distinct chromatin-associated and soluble transcription factor complexes.Molecular Systems Biology.2015 , IF=8.991.

    【研究内容】:转录因子(TF)是细胞信号通路的靶标和执行者。在这项研究中,作者对56个TF的可溶性和染色相关复合物进行了蛋白质组学分析,利用串联亲和纯化和质谱(TAP/MS)技术进行纯化,并鉴定其中的蛋白质-蛋白质相互作用。研究为大量的TF提供了有价值的蛋白质-蛋白质相互作用网络资源,强调了TF形成不同位置特异性的蛋白质复合物的一般原理,这些复合物与TF的不同调控和不同功能有关。

    使用技术串联亲和纯化质谱(TAP-MS)

    产品细节图片2

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    产品细节图片3

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