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- 经科
- 上海
- JK-097
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 保质期：
1年
- 库存：
大量现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
200ml
适用范围：外周血或者组织裂解液中的单个核细胞的分离；如外周血淋巴细胞的分离、脐血造血干细胞的分离、脂肪间充质干细胞的分离等等；
作用机理：密度梯度沉降法是根据细胞密度差异，借助细胞分离液和离心，进行细胞分离纯化的常用方法之一。样本密度分离液产生一定程度的密度梯度，将稀释后的全血铺层于分离液之上。离心后，红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。
产品优势：
1、原料严格质控
用 途: 通过密度分离作用，用于样本中淋巴细胞的分离，以便于对淋巴细胞的进一步分析。
主要组分: 聚蔗糖、泛影葡胺等。
检验方法:
1、取新鲜抗凝全血，EDTA（枸橼酸钠或肝素）抗凝剂均可。
2、用等体积PBS或0.9%NaCl稀释全血。
3、在离心管中加入抗凝未经稀释等体积的分离液，将稀释后的血样缓慢加至分离液面上，保持两页面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、PBS（或生理盐水）体积比1:1:1。
4、室温，水平转子700-800g（2000-2500rpm）离心20min。
5、离心结束后，管底是红细胞，中间层是分离液，最上层是血浆/组织匀浆层，血浆层与分离液层之间是一层薄较致密的白膜，即：单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞）层。
6、小心吸取白膜层到另一离心管中。
7、用PBS或RPMI 1640稀释到一定体积，颠倒混匀。室温，水平转子250g（1000rpm）离心10min，弃上清。
8、重复洗涤1-2次。
9、用PBS或合适的培养基将淋巴细胞重悬备用。
实验要求：样本、分离液及分离环境温度为20±5℃。
保存条件：常温避光保存（或4℃冰箱）。
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文献和实验棕色小玻璃瓶，标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
用淋巴细胞分离液分离单个核细胞 1 ）分离外周血中的单个核细胞（ PBMC ） 1． 抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含 5 ～ 10IU/ml 肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心 500 × g 20 分钟。此时离心管中形成 5 层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是 PBMC ，淋巴细胞分离液层和最下面的红细胞层之间是粒细胞
【求助】急！请问淋巴细胞分离液分离的淋巴细胞需要设门吗？参与者：二分之一幸福分析T细胞亚型，通过淋巴细胞分离液分离的淋巴细胞，需要向白细胞那样设门吗？谢谢！参与者：liu2050淋巴细胞分离液分离出来的是单个核细胞而不仅仅是单纯的淋巴细胞，还包括nk等一些其他种类单个核细胞。你要分离T细胞亚型，肯定需要2色以上标记，一种是总t细胞的标记，另外一种才是你需要检测的细胞亚型的标记。用总T的标记来圈门，门里面再显色的细胞才是你需要的细胞，这样的标记方法才能保证你要的T细胞亚型检测的更准确些！参与
1）分离外周血中的单个核细胞（PBMC） 1．抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是PBMC，淋巴细胞分离液层和最下面的红细胞层之间是粒细胞层，又成为棕黃层。 2．吸去最上层的血浆，收集血浆层和淋巴细胞分离液交界
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