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- Ms1034-0201
- 2025年12月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 克隆性：
多克隆
- 规格：
0.1ml
本品为辣根过氧化物酶（HRP）标记的鼠抗-ApoA1 单克隆抗体。该特异性针对于ApoA1的抗原位点，与人血清其他成分无任何交叉反应。可用于ELISA、IHC、 Blot等科学研究实验。
本品使用或存放时须避开强光源， -２０℃存放。不含任何添加剂或防腐剂，使用时注意避免交叉污染。
实验试剂
1. 0.1M NaIO4：称取241mg高碘酸钠溶于蒸馏水10ml中。
2. 1mM PH4.4醋酸钠缓冲液：0.2M NaAc (1.361克/50ml) 3.7ml；0.2M HAc (0.601ml/50ml) 6.3ml；加蒸馏水至2,000ml。
3. 0.2M PH9.5碳酸盐缓冲液：Na2CO3 0.32g；NaHCO3 0.586g；加蒸馏水至50ml，再用蒸馏水作20倍稀释，即成0.01M PH9.5的碳酸盐缓冲液。
4. NaBH4溶液(4mg/ml)：临用时称取NaBH4 4mg溶于1ml蒸馏水中。
5. 其它的试剂及器材可参见戊二醛标记法。
实验步骤
1. 称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中。
2. 于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟。
3. 将上述溶液装入透析袋中，对1mM PH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜。
4. 加20μl 0.2M PH9.5碳酸盐缓冲液，使以上醛化桯RP的PH升高到9.0-9.5，然后立即加入10mg IgG(抗体，或SPA 5mg)在1ml 0.01M碳酸盐缓冲液中，室温避光轻轻搅拌2小时。
5. 加0.1ml新配的4mg/ml NaBH4液，混匀，再置4℃ 2小时。
6. 将上述液装入透析袋中，对0.15M PH7.4 PBS透析，4℃过夜。
7. 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃ 1小时。
8. 3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。
9. 将上述溶液装入透析袋中，对0.15M PH7.4的PBS缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
10. 结果判定
除标记物IgG量的计算，略有不同以外，其余均同戊二醛法。
IgG量(mg/ml)＝(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62
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文献和实验人载脂蛋白A (APO A)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 APO A 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 APO A与单抗结合，加入生物素化的抗人 APO A ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸
标记的 载脂蛋白A1(apo-A1) 抗体结合，形成抗体- 抗原 - 酶标抗体复合物 ，经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 载脂蛋白A1(apo-A1) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（ OD 值）， 通过标准曲线 计算样品 中 大鼠载脂蛋白A1(apo-A1) 浓度。 试剂盒组成 ： 试剂盒组成
标记的 载脂蛋白A1(apo-A1) 抗体结合，形成抗体- 抗原 - 酶标抗体复合物 ，经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 载脂蛋白A1(apo-A1) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（ OD 值）， 通过标准曲线 计算样品 中 大鼠载脂蛋白A1(apo-A1) 浓度。 试剂盒组成 ： 试剂盒组成
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