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-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
T4 Polynucleotide Kinase
- 库存:
305
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
200U
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京T4聚核苷酸激酶说明书,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京T4聚核苷酸激酶说明书
规格:200U
品牌:百奥莱博
英文名:T4 Polynucleotide Kinase
产地:国产|进口
编号:BTN120506
产品简介:
该酶能够催化磷酸在ATP的γ-位和寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5"-羟基末端以及3"-单磷酸核苷间进行转移和交换。该酶还具有3"磷酸酶活性,将3"-磷酸基团从寡核苷酸的3"磷酸末端、脱氧3"-单磷酸核苷和脱氧3"-二磷酸核苷上水解掉。
该酶主要用途是:
1.DNA或RNA的末端标记,用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2.寡核苷酸5"末端的磷酸化,以便进行连接反应。
3.除去3"磷酸基团。
活性单位定义:
以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃,pH7.6的条件下,30分钟内使1 nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
纯度:
1.10 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.5 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
反应条件:
反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0) 500 mM,MgCl2 100 mM,DTT 50 mM。* Buffer在溶解时,如果出现少量沉淀属正常现象保温后使用不影响反应性能。
Buffer成分:
Tris-HCl(pH7.5) 50 mM,KCl 50 mM,DTT 1 mM,ATP 0.1 μM,Glycerol 50 %。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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北京T4聚核苷酸激酶说明书关键词:T4聚核苷酸激酶,BTN120506,百奥莱博
·青链霉素溶液
编号:BTN90307
英文名称:Penicillin-Streptomycin Solution
规格:100mL
产品简介:
本产品是100×的青链霉素溶液,具有双抗性的浓缩溶液,青霉素浓度为10000IU/mL,链霉素浓度为10 mg/mL,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,可以用于细胞培养时去除污染。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·BLOTTO溶液
编号:BTN100812
英文名称:BLOTTO Solution
规格:100mL
产品简介:
BLOTTO全名是Bovine Lacto TransferTechnique Optimizer,是一种含有 脱脂奶粉、磷酸盐和抗菌剂的杂交阻断剂,可以用于DNA杂交(Southern杂交、斑点杂交、菌落杂交)、Western杂交、ELISA;但不能用于RNA杂交和低拷贝的Southern杂交。也不能与含高浓度的SDS混用。
运输及保存:
低温运输、- 4℃ 保存(不能保存在-20℃),有效期一年。
·TCEP盐酸膦
编号:BTN131055
英文名称:TCEP•HCl
规格:1g
产品简介:
本产品全名是Tris[2-carboxyethyl] phosphine hydrochloride), 中文名是Tris[2- 羧乙基] 盐酸膦,它是高效、水溶性、无味的还原剂,其特点是选择性并彻底地还原最稳定的、水溶性的烷基二硫键。在室温、pH 为5 的条件下,在五分钟内高效地还原。水溶性为310 克/ 升。抵抗空气氧化;非挥发性并且对于蛋白中的其它基团无反应活性。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京T4聚核苷酸激酶说明书关键词:T4聚核苷酸激酶,BTN120506,百奥莱博
·无机焦磷酸酶,热稳定
编号:BTN130657
英文名称:Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
规格:250U
产品简介:
无机焦磷酸酶 (PPase) 催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。
它具有下列特点:
1.增强 DNA 复制
2.100℃ 加热 4 小时,酶仍具有 100% 活性
活性单位定义:
1 单位指标准反应条件下 [0.5 ml 反应体系,50 mM Tricine(pH 8.5), 1 mMMgCl2和0.32 mM PPi,75℃ 反应 10 分钟],每分钟催化从无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐的酶量。
Buffer 成分:
20 mM Tris-HCl,100 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!
。 (7)吸取上清,为核蛋白提取物。 (8)马上进行EMSA实验。 探针制备: 用γ-32P-ATP及T4多核苷酸激酶对合成的转录因子结合和突变型寡核苷酸的两条互补链分别进行末端标记。20 µl反应总体积中,加寡核苷酸10 pmol,10×T4多聚核苷酸激酶缓冲液2µl,γ-32P-ATP 3 pmol,T4多核苷酸激酶10 u,37 ℃反应45 min,再置于68 ℃ 10 min灭活。在离心管中加入退火反应液60 µl,互补配对的两条链的标记产物各20 µl,于95 ℃变性5min,缓慢降温
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚核苷酸激酶
RNA探针的基础。这两种标记方法产生探针量大,而且产生的探针不受载体序列的影响,所需要的线性化的质粒DNA大约1 ug,但需要高纯度的模板。5、寡核苷酸的“接尾法”。末端脱氧核苷酸转移酶可将三磷酸脱氧核苷加到DNA分子游离的3’-OH末端。这种脱氧核苷酸连接将在探针3’末端形成一个延伸的“尾巴”。用这种方法可加上许多基因以产生高比活性的探针,适用于基因库中克隆序列的鉴定,基因组DNA样品的点突变检测和原位杂交。6、5’端寡核苷酸的T4多聚核苷酸激酶法。T4多聚核苷酸激酶可将γ-32P-ATP的γ-磷
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