SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒

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北京百奥莱博专业生产供应SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：XH114
规格：100T
试剂盒组成:
1， 封闭液（5%BSA）：10ml。
2， 3% H2O2：10ml。
3， Bio-兔抗山羊IgG：浓缩液100ul。
4， SABC-POD:浓缩液100ul。
5， 稀释液：30ml。
6， 显色液（1ml+1ml）:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B。
试剂盒保存：如果一段时间不使用，请将所有试剂存放于-20℃，如经常使用，可将封闭液，封闭液和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用
试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为山羊IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖氨酸。
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4）
3． 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、苏木素
实验步骤: 微量试剂请离心后使用
以石蜡切片为例
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.4）洗涤1-2次。b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟， PBS（pH7.2-7.6）洗涤2-3次。c、跳过此步，直接进入下一步。
4． 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5．用稀释液将一抗（如山羊抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6．根据使用量，用稀释液将Bio-兔抗山羊IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗山羊IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗山羊IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
7．根据使用量，用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液，混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
8．DAB显色:根据用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制，按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞片，常规固定后，PBS漂洗两次，再用0.5%Txiton X-100室温20分钟，PBS漂洗两次，3%H2O2处理15分钟；PBS漂洗两次，下接上面第4步。

对于冰冻切片，固定后，可用PBS漂洗两次，再接上面第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。


因为免疫组化指标众多，标本不一，此步骤仅作参考。
关于SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·HRP－羊抗猪IgG
编号：XH100
规格：100ul/1ml
辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗猪IgG是将辣根过氧化物酶（HRP，来源于SIGMA），经过碘酸钠氧化而标记在抗体羊抗猪IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，而制成HRP－羊抗猪IgG。
保存条件：-20℃冻存。浓度：抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围：HRP－羊抗猪IgG主要用于一抗来源于猪多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化，Western blotting，ELISA等实验。

主要性能：
免疫组化：1：20～50，DAB显色
免疫印迹法：1：100～400，DAB显色，1：1000～5000，ECL发光显色
ELISA法：1：500～2000（最高可达一万），用TMB显色


SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒关键词：SABC,XH114,山羊IgG

·DNA病毒基因组提取试剂盒
编号：XH009
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组，不适合于RNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳，放出DNA，用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项
1．如果病毒含量过低，最后提取的基因组DAN电泳可能无法检测到，但PCR等其他实验还会有结果。
2．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1、 取病毒上清液0.5ml，12000rpm离心5min，尽量取上清使用，弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K，充分混匀，65℃消化10-20min，期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液，充分混匀。
4．玻璃奶摇匀。加入20ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
5．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入30－50ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所得DNA。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


SABC(山羊IgG)-POD免疫组化试剂盒关键词：SABC,XH114,山羊IgG

·pET-32a(+)
编号：XH044
规格：25ug(0.5OD)
载体类型：大肠杆菌表达载体
载体大小： 5900 bp
载体宿主：大肠杆菌（E.coli）
细菌抗性：氨苄青霉素（Amp）
5" 测序引物：S Tag primer
3" 测序引物：T7 terminator primer
载体简介：
The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fusedwith the 109aa Trx Tag thioredoxin protein . Cloning sites are available for producing fusionproteins also containing cleavable His Tag and S Tag sequences for detection and puri cation.Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression regionof the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented
so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corre-sponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using theT7 terminator primer.

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