通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销

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北京百奥莱博专业生产供应通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50T/100T
编号：XH050
5×M-MLV Buffer、10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、RNase-free ddH2O在2-8℃保存一个月对实验无影响，Oligo(dT)16(10uM)、Random(N)6(10uM)、dNTPs(10mM)在2-8℃保存一周对实验无影响，为了你的实验方便和试剂的稳定性，请自行决定试剂存放温度。试剂解冻后请混匀离心后再使用。微量试剂打盖前请离心。
产品简介：
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用M-MLV进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
本产品配有两种引物，一种为Oligo(dT)，另一种为随机引物（Random），如果用Oligo(dT)无法得到想要的结果，可以用随机引物（Random）试一下。
操作步骤：
一、反转录反应
1、在冰浴的无RNase的离心管（或者PCR管）中加入如下反应成分：
1-5ug总RNA或50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT)16或2ul Random(N)6或者2 pmole基因特异性引物
补RNase-free ddH2O至13.5ul
2、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
4ul 5×M-MLV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul Rnasin
1ul M-MLV
3、42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。
4、95℃加热5min终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50ul，取2-5ul进行PCR反应。

二、PCR反应
1、按以下各组分配制50ul PCR反应体系：
10×PCR Buffer 5ul
MgCl2 4ul
dNTPs 1ul
上游引物（用户自备）
下游引物（用户自备）
RT反应产物 2ul
Taq Polymerase 0.5ul
ddH2O x ul
Total Volume 50ul
2、简短离心，上PCR仪扩增，琼脂糖观察结果。

注意事项：
1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应避免反复冻融，有效期12个月。
3、RNA样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。
除通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·PCR试剂盒（教学用）
编号：XH049
规格：50T/500T
常规PCR发展到如今已经是非常成熟，对于大多数的科研人员来说，买TAQ酶和dNTP就可以，而如果为省事，可以直接买PCR MasterMix。而本试剂盒从PCR的原理来让学生学会PCR。本试剂盒带有模板和引物，可以产生500bp的单一条带。
试剂盒组成：
试剂盒组成
50次
500次
储存条件
Taq Polymerase(5U/ul)
50ul
500ul
-20℃
10×PCR Buffer
1ml
5ml
-20℃
MgCl2(25mM)
1ml
5ml
-20℃
模板（1ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
上游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
下游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
ddH2O（PCR用）
2ml
25ml
-20℃
6×DNA Lodding Buffer
1ml
1ml
-20℃
500bp对照（50ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
说明书
1份
1份
RT
保存说明：10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O（PCR用）在2-8℃保存一个月对实验无影响，500bp对照、模板和引物在2-8℃保存一周对实验无影响。微量试剂打盖前请离心。
自备试剂：琼脂糖，电泳缓冲液，核酸染料（如EB，goldveiw等）
操作步骤：
按照下面的量加入试剂：可一次配50ul，或者一次配更多的量，如500ul，混匀再分成50ul一管。一般Taq Polymerase最后加入。
加入试剂
加入量总50ul
加入量500ul
ddH2O（PCR用）
37ul
370ul
10×PCR Buffer
5ul
50ul
MgCl2(25mM)
4ul
40ul
模板（1ng/ul）
2ul
20ul
上游引物(10mM)
2ul
20ul
下游引物(10mM)
2ul
20ul
Taq Polymerase(5U/ul)
1ul
10ul
总体积
50ul
500ul
混匀。
按照下面的条件设置反应
温度
时间
循环次数
94℃预变性
3min
1 cycles
94℃变性
30sec
30 cycles
54℃退火
30sec
72℃延伸
500-2000bp/1min
72℃终延伸
5min
1 cycles
反应完降温到25℃
反应完后，取5ul产物，加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混匀电泳检测。可同时在两测跑一个500bp的对照。（1.5%的胶可以得到理想的结果）


通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销关键词：通用RT-PCR试剂盒,XH050,两步法M-MLV
BL1150 D-PBS，液体，不含钙、镁和酚红
4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐 Butyl-PBD 16593-81-0
BL0949 胶体金标记羊抗人IgG抗体
BTN90313 TBE电泳液,10× TBE Buffer, 10×
偶氮胂Ⅰ D-Phenylglycinol 3547-38-4
ARB13187 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)elisa测定使用说明书 Mouse insulin-like growth factor binding protein 1,igfbp-1 ELISA KIT
ARB10496 人白介素9(IL-9)ELISA代测服务 Human interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
D-葡萄糖-1-磷酸二钠 Bleomycin sulfate 150399-99-8、56401-20-8
F040102 鸡卵清蛋白偶联克伦特罗 OVA-CLE
BTN130514 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic
M0403 兔IgG预装亲和柱
ARB10752 人抑制素B(INHB)代做ELISA实验
ARB12089 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)尿液中含量检测 Rat aquaporin 5,aqp-5 ELISA KIT
通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)特价促销关键词：通用RT-PCR试剂盒,XH050,两步法M-MLV

·羊抗人IgG（纯化抗体）
编号：XH095
规格：1mg/10mg
先以A蛋白从正常人血清中纯化免疫球蛋白人IgG，用此人IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫酸铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗人IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以人IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·SABC(兔IgG)-FITC免疫组化试剂盒
编号：XH113
规格：100T
试剂盒组成:
1， 封闭液：10ml，5%BSA
2， 生物素化羊抗兔：浓缩液100ul。
3， SABC-FITC:浓缩液100ul。
4， 稀释液：30ml。
5， 抗荧光衰减封片剂

试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖氨酸。
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4）
3． 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2．热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。
3．滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4．用稀释液将一抗（如兔抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
5．根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
6．根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃，30分钟(避光)。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
7．滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。

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