- ￥780 - 25190
- Sino Biological
- 北京
- 10381-H07H
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Human Thrombopoietin / THPO / TPO Protein (His Tag)
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1.00 mg/5.00 µg/20.00 µg/100.00 µg
| 规格： | 1.00 mg | 产品价格： | ￥25190.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5.00 µg | 产品价格： | ￥780.0 |
| 规格： | 20.00 µg | 产品价格： | ￥1780.0 |
| 规格： | 100.00 µg | 产品价格： | ￥3980.0 |
蛋白名称：Human Thrombopoietin / THPO / TPO Protein (His Tag)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the mature form of human THPO (NP_000451.1) (Ser 22-Gly 353) was fused with a polyhistidine tag at the N-terminus.
表达宿主：HEK293 Cells
蛋白纯度：> 90 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性：Measured in a cell proliferation assay using MO7e human megakaryocytic leukemic cells. The ED50 for this effect is typically 10-60 ng/ml.
蛋白内毒素：< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端：Ser 22
蛋白分子量：The recombinant human THPO consists of 348 amino acids with the predicted molecular mass of 37.6 kDa. As a result of glycosylation, rhTHPO migrates as an approximately 78.2 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号：NP_000451.1
蛋白氨基酸序列：Ser22-Gly353
蛋白标签：N-His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了，但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度，或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素） 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
超声细胞粉碎仪粉碎3rnin。其匀浆经纱布过滤。1 000r／rain离心10min，上清用35 000Xg离心45min(4℃)，沉淀物用上述PBS洗3次，将沉淀物再溶于2mLPBS中，然后加20mLl0％去氧胆酸钠和20mL 0．14~／,胰酶，室温作用1h，立即离心10 000 X g 20rain(4℃)，过SephadexG-200凝胶柱，同上PBS洗脱。收集主峰蛋白，PBS透析后再用抗人全血清Sevharose4B亲和层析柱吸收，—20cC保存备用。
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