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北京鼎国
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文献和实验佚名 1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶,该酶以RNA为核板,根据碱基配对原则,按照RNA的核苷酸顺序(其中V与A配对)合成DNA。这一过程与一般遗传信息流转录的方向相反,故称为反转录,催化此过程的DNA聚合酶叫做反转录酶(reverse transcriptase)。后来发现反转录酶不仅普遍存在于RNA病毒中,哺乳动物的胚胎
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理
组织或细胞中的总 RNA, 以其中的 mRNA 作为模板 , 采用 Oligo(dT) 或随机引物利用逆转录酶反转录成 cDNA. 再以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增 , 而获得目的基因或检测基因表达 .RT-PCR 使 RNA 检测的灵敏性提高了几个数量级 , 使一些极为微量 RNA 样品分析成为可能 . 该技术主要用于 : 分析基因的转录产物 , 获取目的基因 , 合成 cDNA 探针 , 构建 RNA 高效转录系统 .
ρ因子 ρ factor 为存在于大肠杆菌中的,在遗传信息转录的终止阶段起作用的蛋白性因子。在以λ噬菌体 DNA为模板合成 RNA的无细胞系统中,已发现有使转录在λ DNA的特定部位停止进行的因子。无ρ因子时,可合成长短不一的 RNA,有此因子时则形成短的均一的 RNA。在其它噬菌体或寄主大肠杆菌的操纵子的转录中,它也起终止因子的作用。大肠杆菌的ρ因子由 4个分子量约 5万的亚基组成,对核酸具有很强的亲和力。在有 RNA存在下,它催化三磷酸核苷酸的分解,这一作用在终止转录的机能中具有
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