RNA体外转录载体构建-载体构建服务

从 DNA 到 RNA，体外转录全揭秘（上）

曾经默默无闻的 RNA 是怎么逆袭成为时代新宠的呢？什么是体外转录？体外转录和基因编辑，RNA 疫苗等这些热门应用的关系是怎样的？如何在体外获得我们的宝藏 RNA？本节课 Dr. 赛将会给大家一一揭秘。

RNAi技术专题之：体外转录合成双链RNA

。不适用于：实验需要大量的，一个特定的siRNA。长期研究。3.用RNase III 消化长片断双链RNA制备siRNA其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。这个方法是选择通常是200—1000碱基的靶mRNA模版，用体外转录的方法制备长片断双链dsRNA ，然后用RNase III (or Dicer) 在体外消化，得到一众siRNAs“混合鸡尾酒”。在除掉

cRNA探针

cRNA 探针       cRNA探针是以eDNA为模板在体外转录而成的探针，可方便地通过已克隆于特定质粒载体的，DNA产生。这些质粒通常在紧邻多克隆位点的位置含有一个噬菌体启动子。应用相关的RNA聚合酶和4种核糖核苷(rNTPs)(其中至少一种带有标记物)进行体外转录反应，依赖DNA的RNA聚合酶以克隆的cDNA为模板，以含有标记物的三磷酸核糖核苷为原料，从启动子下游开始在体外转录产生RNA。通过改变外源cDNA在质粒中的插入方向或选用不同的RNA聚合酶，可以控制RNA的转录