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- 2025年10月31日
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深圳子科生物
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文献和实验20X SSPE BUFFER 3 Liters 525.9g NaCl sodium chloride 82.8g NaH2 PO4 sodium phosphate monobasic 28.2g EDTA powder FW=372 bring up to 2400mls with H2 O add NaOH to pH 7.4 (~27mls/liter
（pH6.8） 1.5 mol/L Tris•HCl（pH8.8） 10% SDS 10% 过硫酸胺（APS） 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶（分离胶）浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
转膜缓冲液非常有帮助。如果 PI 接近转膜缓冲液的 pH 的话，蛋白质电离程度小，带的电荷就少，转印效率就会非常低。所以对这种蛋白质，你选择常规的 pH8.8 的转膜缓冲液可能就不合适，至少应该选 pH11 的 CAPS 转膜缓冲液或者用 0.7% 乙酸的酸性转膜液效果才会比较好。否则不管你转膜时间多长，蛋白质都在凝胶里一动不动，显然实验室不会出结果的。如果你用酸性转膜液的话，记得把膜放在凝胶的上面，因为此时蛋白质是往负极移动的。
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