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- 2025年08月25日
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78
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深圳子科生物
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200ml
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文献和实验转印夹，注意 PVDF 膜与胶，PVDF 膜与滤纸，滤纸与胶之间不可有气泡。 2） 转印槽加满转膜缓冲液，插入电转印夹，将转印槽放入冰水中，确保 PVDF 膜靠近正极，带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3） 转膜选择恒流，每个转印槽建议电流为 150-300 mA，时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4） 转膜结束后，将 PVDF 膜置于丽春红染色液中，室温 5-10 分钟即可见红色条带，用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1） 漂洗印迹膜：使用洗涤缓冲液室温适当漂洗
llh刘丽华 各位好：我做了1个多月western blot了，内参跑得还可以，但是目的蛋白总是跑不好，今天跑出来非特异性条带很清楚，而目的条带却很淡，不知是什么原因！前一次也是这种情况，我就延长封闭时间至2h，一抗1:700，二抗1:5000，请各位高手帮忙分析一下吧！下面是我的图片，最下面，模糊的一条（靠图片中间的一条）是我的目的条带！ coffeeshine 如果非特异带很清楚，延长封闭时间没作用
xylish1 菜鸟一枚，目前要做HER-2（膜蛋白，185KD）western blot ，求教各位，一抗哪个公司的好？使用时抗体浓度，转膜时间及注意事项，多谢！ zhe992000 搭车求助，我想验证肿瘤组织中透明质酸（hyaluronan）的表达水平，这是一个糖蛋白，主要在细胞外基质中表达。在文献上一般是通过透明质酸合成酶的水平 或者透明质酸水解酶的水平来间接判断透明质酸的表达水平，我想直接测定透明质酸的表达量，不知
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