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20ul
自从Cas9用于基因编辑技术以来,其廉价、方便、高特异性的优点让其他的基因编辑技术望而止步,其在疾病治疗领域的作用更让其大放光彩,Cas9从此独步天下。武林至尊,宝刀cas9,号令天下,莫敢不从,倚天不出,谁与争锋。
现在倚天剑出世了,它便是NgAgo。该技术利用嗜盐碱杆菌属的Argonaute(一类庞大的蛋白质家族)来实现DNA引导的基因组编辑。该技术通过gDNA来引导内切酶的切割,可以外源转入细胞,而不是利用gRNA的Cas9,这样操作更容易;靶序列不需要Cas9所需的PAM序列,因而其可以切割任何序列,应用更广泛;该技术利用的5’磷酸化的单链DNA,这种形式的DNA在哺乳动物中非常罕见;NgAgo的氨基酸数目只有Cas9的 2/3 ;NgAgo的gDNA只有24个碱基,比Cas9的gRNA要简单的多;NgAgo在切除DNA时会同时去掉几个碱基;NgAgo也具有非常高的特异性。
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