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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
避光6个月
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
2×500ml
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文献和实验1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
【求助】求助:Western blotting曝光没有任何条带,也没有背景,为什么?
2、二抗被灭活 想一想操作过程有无上述失误 zhongqiuxie 原因太多。一抗问题可能性更大。另外注意显影机是否很久没换显影定影液了? yunzh375 我觉得可能是蛋白、发光液的问题吧 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.(9)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗10min.(10)1%戊二醛洗10min.(11)双蒸水洗5min.(12)1%明胶洗5min.(13)银避光显影8~15min.(14)双蒸水洗15min.(15)固定:用显影定影液(1:4或1:10)固定5min,也可以用15%硫酸钠-20%硫代硫酸钠混合液固定1~3min,或用1%戊二醛固定5min,50℃温水洗3~6min. (16)衬染,核固红衬染3min或甲基绿衬染3min. (17)常规
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