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- Thermo scientific -fermentas
- FD1654
- 2025年10月04日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1654 | 20 µl (20 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD1654 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 55°C | 15 | 60 | 15 | 30 | 3 | No (chloroform extraction) |
16 |
Lambda DNA
1.4%琼脂糖
181 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在55°C，1X FastDigest® 缓冲液中15分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液，55°C。
1 µl FastDigest® TauI可在
– 15分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 60分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 15分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 30分钟内酶切1 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® TauI可在
– 15分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 60分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 15分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 30分钟内酶切1 µg基因组DNA。
备注
- FastDigest® TauI很难完全酶切某些底物。
- FastDigest® TauI可能会吸附在切割的DNA分子上，从而改变DNA条带的电泳纯移率。为了避免出现非正常条带，上样电泳前，建议采用6X Loading Dye & SDS溶液(#R1151)处理样本，或者在 DNA酶切产物中加入SDS并加热处理。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | GCSGC |
阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 181 | 17 | 7 | 21 | 7 | 7 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 8 | 8 | 10 | 10 | 12 | 22 |
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