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- roche
- 罗氏 4655885001
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
见产品外包装
- 英文名：
Transcriptor One-Step RT-PCR Kit
- 库存：
需确认
- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
见产品外包装
- 保存条件：
−20°C
- 规格：
150 REACTIONS
Transcriptor 一步法 RT-PCR 试剂盒
sufficient for 50 reactions, sufficient for 150 reactions, suitable for RT-qPCR, suitable for RT-PCR, hotstart: no
别名:
RT-PCR
一般描述
一步法 RT-PCR 是一种非常灵敏的技术，用于确定 RNA 模板的存在与否，或通过 RNA转录水平的定性、半定量或定量分析来量化表达水平（例如，用于病毒水平定量）。该 RT-PCR 方法还有助于扩增用于克隆的极少量的模板。一步法形式十分方便，反应间差异性降低，并通过最da限度减少手动操作，防止污染。
Transcriptor 一步法 RT-PCR 试剂盒提供具有突出优势的 Transcriptor 反转录酶，以及优异的热启动一步法 RT-PCR 形式。
对于热启动一步法 RT-PCR，利用 Transcriptor 反转录混合物、Protector RNA 酶抑制剂和扩展系统，以及创新型热启动缓冲液（正在申请专利）。
Transcriptor 一步法 RT-PCR 试剂盒便利地提供一步法 RT-PCR（引物和模板除外）所需的所有组件。50 个反应包装尺寸还包含 10 个对照反应（对照 RNA 和对照引物混合物）。
该试剂盒的 RT-PCR 酶混合液含有 4 种不同的酶：Transcriptor 反转录酶确保了高产量、高灵敏，以及强力的转录；Protector RNA 酶抑制剂，在高温下完全保持活化，在反转录过程中给模板提供最da程度的保护；和扩展系统——由 Taq DNA 聚合酶和校正聚合酶组成的混合物——最da限度地降低突变的可能性，确保 PCR 的高产量和保真度。
优化的 RT-PCR 反应缓冲液包含高质量的 dNTP，并提供整体性能改善的热启动系统。缓冲液独特的热启动组分在较低温度下结合并隔离引物，防止引物与非特异性位点结合。另一种组分以温度依赖性方式结合镁离子，防止不受控的 DNA 合成。这种新型缓冲液配方在反转录和 PCR 过程中均有效，从而提高了特异性和灵敏度。
优化的反应缓冲液和酶混合物联合使用确保了有复杂的二级结构和高 GC 含量的难度模板在不提高反应温度的情况下实现高效转录。
应用
Transcriptor 一步法 RT-PCR 试剂盒设计用于使用基因特异性引物对 RNA（总 RNA、mRNA、体外转录的 RNA 或病毒 RNA）进行快速、灵敏、特异的终点 RT-PCR 分析。
该试剂盒的特色是一种创新型反应缓冲液，并结合了高灵敏、高产的逆反转录和性能改善的热启动系统，适用于高保真、高效地扩增多种模板，甚至是富含 GC 的 RNA 模板。
该试剂盒提供了一种方便、高灵敏度的一步法 RT-PCR 方法，可生成高达 6.5 kb 的转录本，适用于以下应用：
- RNA 转录水平的定性、半定量或定量分析
- 确定 RNA 模板的存在与否
- 通过 RNA 分析定量基因表达（例如，用于病毒水平定量）
- 克隆高达 6.5 kb 的 RNA
该一步法形式十分方便，减少了反应间的变化，并通过最da限度减少手动操作，防止污染。
转录因子一步 RT-PCR 试剂盒已用于扩增：
- 丙型肝炎病毒（HCV）片段
- 重链 CH3 区和轻链聚A区
- 鼠白血病病毒（MLV）
| 4655885001 | Transcriptor One-Step RT-PCR K 转录因子 | 1 kit 150 rx of 50 µl |
| 10220566001 | Restr.-Endonucl. Sma I, 1000 U | 1,000 U (10 U/µl) |
| 10567639001 | Restr.-Endonucl. Bgl II, 2000U | 2,000 U (10 U/µl) |
| 10656305001 | Restr.-Endonucl. Hind II, 2500 | 2,500 U (3 - 10 U/µl) |
| 10667153001 | Restr.-Endonucl. Eco RV, 10 00 | 10,000 U (10 U/µl) |
| 10779679001 | Restr.-Endonucl. Hinf I, 5000 | 5,000 U (10 U/µl) |
| 10835315001 | Restr.-Endonucl. Nco I, 200 u | 200 U (10 U/µl) |
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文献和实验检测或定量。另外，这项技术还可以用来检测基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术，更灵敏，更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物（GSP）起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行
基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术，更灵敏，更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物（GSP）起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行，然后取出1/10的反应产物进行PCR。在一步法
.nih.gov查它的序列，并用oligo等软件设计引物。 RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。两步法RT-PCR比较常见，在使用一个样品检测或克隆多个基因的mRNA时比较有用。在两步法RT-PCR中，每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行，然后取出1/10的反应产物进行PCR。而一步法RT-PCR具有其它优点（表4.2），cDNA合成和扩增反应在同一管中进行，不需要打开管盖和转移，有助于减少污染。还可以得到更高的灵敏
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