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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer Tango™ | 50X SAM | ||||
| ER1811 | 100 u (1-3 u/µl) | 1.00 ml | 0.10 ml | ER1811 | |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| Tango™ | 37°C | 20-50 (+SAM) | 20-50 (+SAM) | 0-20 (+SAM) | 0-20 (+SAM) | 100 (+SAM) | 50-100 (+SAM) | 1X (+SAM) |
Lambda DNA
1.0%琼脂糖
38 切割位点
[33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA] + 0.05 mM S-腺苷甲硫氨酸。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% �v/v)甘油。
备注
- FaqI酶活性需Mg2+ 离子参与,S-腺苷甲硫氨酸可刺激FaqI酶活性。0.05 mM S-腺苷甲硫氨酸可将FaqI酶活性提升2倍。但是FaqI仍然很难完全切割某些底物DNA分子。
- FaqI浓度是底物DNA分子获得最大切割水平时对应的浓度,并且要保证此浓度不会改变酶切的带型。
- FaqI可能会吸附在切割的DNA分子上,从而改变DNA条带的电泳纯移率。为了避免出现非正常条带,上样电泳前,建议采用6X Loading Dye & SDS溶液(#R1151)处理样本,或者在 DNA酶切产物中加入SDS并加热处理。
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CW GG GAC...3' |
不阻止酶切 |
| CpG | 5'...GGGAm5C G ...3' |
阻止酶切 |
| CpG | 5'...m5C G GGAC...3' |
阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 0-20 | 50-100 | |||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 38 | 2 | 2 | 4 | 0 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 7 |
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文献和实验内切酶列表:Enzymes Generating 5‘-protruding Ends
CGCG GGGAC(10/14)^* BsmFI NNNN G^GGCCC Bsp
2 3 4 5 FaqI 0-20 50-100 FspAI 0-20
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