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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD0933 | 50 µl (50 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0933 | |
| FD0934 | 100 µl (100 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0934 | |
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 5 | 5 | 3 | 65°C, 10 min | 16 |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
5 切割位点
1 µl FastDigest® Bsp1407I可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 5 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
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文献和实验做了点甲基化研究,从头下来,也有一点点体会。也看了院子里不少牛人的新的体会。本人将每一个步骤的具体操作、每个操作的具体注意事项和心得进行初步总结,慢慢叙来,抛砖引玉,欢迎拍砖。 做到现在,有成功的喜悦,也有失败痛苦,且行且歌,总得来说,BSP/MSP,想说爱你不容易。 如有时间,想谈谈:BSP/MSP引物设计;基因组海量甲基化数据分析;MSP设计及操作;当前MSP的研究进展,等等吧…… 1. 确定目的基因后,登陆一下网址:http://genome.ucsc.edu
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