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- Thermo scientific -fermentas
- K1213
- 2025年10月13日
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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| K1213 | for 10 react. | K1213 | |
| K1214 | for 30 react. | K1214 |
PCR产物克隆步骤
- Features
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- 快速克隆 一 从PCR完成到细胞铺平板大约只需1小时。
- 高效 一 超过90%的重组克隆包含目的DNA。
- 一步操作 一 无需PCR片段修饰步骤。
- 兼容 一 与Long PCR Enzyme Mix (#K0181)、Taq 、Tth 、Tfl 及其它无校正酶活性的聚合酶兼容。
- 方便的pTZ57R/T克隆载体：
一 即用型：线性化、3’-ddT加尾；
一 多克隆位点特殊设计，便于作图和插入片段操作；
一 蓝/白斑筛选；
一 M13/pUC引物位点便于测序和克隆PCR筛选；
一 T7启动子介导插入片段体外转录。
- Applications
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- TA克隆。
- 插入片段的体外转录。
- 克隆插入片段的测序。
说明
InsTAclone™ PCR Cloning Kit是一种TA克隆系统，只需一步操作即可克隆含有3’-dA突出末端的PCR产物(Taq DNA聚合酶或其它缺乏校正活性的热稳定DNA聚合酶扩增获得)(1)。试剂盒含有即用型克隆载体pTZ57R/T(见图1)，其质粒骨架来源于pTZ57R载体。克隆位点两端的3’-ddT突出可防止载体自身环化，保证低背景的高效克隆。为提高克隆的速度、效率和方便性，InsTAclone™ PCR Cloning Kit搭配有独特的TransformAid™ Bacterial Transformation Kit。依照操作说明，连接和感受态细胞制备可平行操作。因此从PCR结束到细胞铺平板仅需1小时，比其它商业化感受态细胞的转化省时。
质量控制
克隆试剂盒功能检测：对照PCR产物克隆，重组克隆比例超过90%。 转化系统功能检测：pUC19 DNA转化大肠杆菌菌株XL1-Blue和JM107，转化效率超过107 转化子/μg超螺旋pUC19 DNA。
组分
- Vector pTZ57R/T
- T4 DNA Ligase
- 5X Ligation Buffer
- Control PCR Fragment
- Control DNA (pTZ57R，含插入片段)
- Vector pTZ57R DNA (无插入片段)
- Water, nuclease-free
- TransformAid™ Bacterial Transformation System:
- C-Medium;
- T-Solution (A);
- T-Solution (B)
- 详细的操作手册
备注
- 购买Fermentas任意产品，可以免费索取冻干菌株GM2163 (#M0099)和JM107 (#M0109) 。
- 该系统适合实验室所有常用大肠杆菌菌株。试剂盒不含大肠杆菌菌株。
图1。pTZ57R/T限制酶切图谱。
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