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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃保存
- 保质期:
2年有效
- 英文名:
ACCUTASE
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
100mL
AccutaseTM是包含有蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液,是胰酶/EDTA消化液的完美替换产品,用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞。适用于组织解离和细胞分离,因分离后的细胞能保持完好的表面抗原,且不含任何动物或者细菌来源组分,可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。
与传统的胰酶消化液相比,本品具有以下优势:
1)适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化,以及昆虫细胞;
2)温和有效的消化干细胞(hESCs和mESCs),冻存后细胞具更高复苏率;
3)几分钟内实现粘附细胞的分离,不需清洗或中和反应,节省细胞传代时间;
4)对细胞消化较为温和,能增加细胞产量和存活率;增强细胞贴壁效率;改善细胞形态和细胞生长特性等。

本品为即用型的无菌产品,溶于Dulbecco’s PBS(含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚红),比活力≥200 u/mL,可直接用于细胞培养相关实验。
运输和保存方法
冰袋运输。收到后请于-20 ℃保存,有效期2年。2~8 ℃保存,有效期2个月。
注意事项
1)AccutaseTM融化后4 ℃保存,至少2个月稳定。不可室温保存。也可分装成单次用量,放到-80℃冻存,至少6个月稳定。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 4 ℃或冰浴融解Accutase,之后进行分装保存。
【注】:不可37 ℃融化本品,否则会影响酶活。
2. 使用不含钙、镁的1×Dulbecco's PBS润洗细胞一次;
3. 以无菌操作的方式,按 75 cm2表面积加入10 mL的Accutase覆盖贴壁细胞;
4. 重新放入37 ℃培养箱内,消化5-10 min;
【注】:消化时间可自行调整。大部分细胞处于Accutase中高达1小时,对细胞状态无影响。
5. 消化结束后,轻轻敲击培养皿,使细胞与皿底部脱离,依照常规操作进行细胞计数和传代。
【注】:不需另做清洗和酶活终止步骤。
HB220715
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[2] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
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。 Q:检测凋亡用的细胞能否固定? A:甲醛固定液会造成结果假阳性,因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是,Annexin V 检测的样本为外周血时,勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q:有没有更好的办法处理贴壁细胞,来做流式凋亡实验? A:检测贴壁细胞时,若消化时间不易控制,建议用 Accutase 细胞消化液,对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q:Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒,该如何选
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清










