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文献和实验报告基因载体 (1)报告基因 载体的特点:除了具有表达蛋白质所需要的结构外,理想的报告基因载体本身无调节结合位点或序列,而具有有意插入的调节结合位点,尽管可以从报告基因载体除去已知的结合位点,减少报告基因上游的转录,但从几千kb的DNA中去除所有潜在的调控序列是不可能的。因此在使用报告基因载体时,应使用合适的对照载体。报告基因质粒载体一般在大肠杆菌中繁殖,因此包括一个DNA复制起始点(ori)和基因筛选标记,通常为氨苄西林抗性基因(Ampr)。另外还具有丝状噬菌体复制起始
janetlee1976 在构建萤光素酶报告基因载体的过程中,我把一个基因的一部分启动子插入到载体中(包含该基因转录起始点),请问是否需要为了避免载体中编码萤光素酶的基因的移码突变,而在转录起始点以下所包含的碱基数必须为3的整倍数呢?比如所包含启动子区域为-1000!~+27(此处是否必须为3的整倍数) woxingwosu 我觉得只要从翻译开始,即ATG, 保持碱基数必须为3的整倍数就可以了。前面的启动子部分没有必要。最好
水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒,用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3(promega)中。 另外,promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer,该选择哪个? 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
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