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- 英文名:
阪崎肠杆菌分离琼脂(ESIATM)
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上海远慕生物科技有限公司
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250g
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文献和实验结果,做好记录。【注意事项】1. 溴化乙啶是致癌剂,并有中度毒性,实验中要戴防水手套,不要污染环境。紫外灯下观察结果时,应戴防护眼镜。2. 也可将溴化乙啶预先加入琼脂糖中,使浓度达 0.5 μg/mL 进行配胶。3. 琼脂糖的浓度一般用 0.8%~1.2% , 可随欲分离核酸分子的大小作调整,分子大用低浓度凝胶,分子小用高浓度胶。分离 RNA 时要用变性胶。(三)DNA 酶切片段的回收【实验方法与步骤】1. 冻融法:(1)在 UV 灯下,用手术刀片将含 DNA 片段的琼脂糖凝胶切下,-70 ℃ 冷冻至少
,目前流行的方法是在离液剂存在下通过将核酸与二氧化硅基色谱柱结合来分离核酸,然后将其从色谱柱中洗脱出来 (图 9 )。 图 9.使用硅胶柱从凝胶中提取 DNA 另一种分离特定条带的非常简单快速的方法是使用带有两排孔的特殊琼脂糖凝胶 [3]。将样品加载到最上一行,随着电泳的进行,从底部一排孔回收所需大小的条带(图 10 )。这种方法尤其适合于 NGS 文库片段制备和下游克隆实验。 图 10.使用特别设计的 E-Gel 预制琼脂糖凝胶。只需三个步骤,即可回收和分离 DNA 条带。将样品加到上面一排孔中
于100mL亚硒酸盐肮氨酸(SC)增菌液内,于36±1℃培养18~24h。5.2 分离取增菌液1环,划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板和一个DHL琼脂平板。两种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。于36±1℃分别培养18~24h(DHL)或40~48h(BS),观察各个平板上生长的菌落,沙门氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和沙门氏菌Ⅲ在各个平板上的菌落特征见表1。表1 沙门氏菌属各群在各种选择性琼脂平板上的菌落特征5.3 生化试验 5.3.1 自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落,分别接种三糖铁琼脂。在三糖铁琼脂
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