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- 保存条件:
常温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Coomassie Blue Fast Staining Solution
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
500ml
考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考马斯亮蓝G250为染料可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的快速染色,亦可用于Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
EZBiolab考马斯亮蓝快速染色液采用自主研发的技术,只需1h就可以检测低达100ng的蛋白电泳条带,而常规方法需 3 小时以上。
保存条件:室温保存,12个月有效。
注意事项:
1. PAGE电泳后凝胶采用蒸馏水清洗的目的在于去除凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较高。
2. 本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. PAGE电泳结束后取凝胶放入约50~100ml蒸馏水中, 在摇床上摇动3min。
2. 弃蒸馏水, 加入适当体积的染色液,使染色液能盖住凝胶。微波炉内加热煮沸1min,取出放在要床上约20-30min。
3. 弃染色液,加入没过凝胶的脱色液(冰乙酸,乙醇)微波炉加热煮沸1min,取出放摇床上脱色20-30min。
4. 重复一次步骤3
5. 倒去脱色液加入适量的水,之后可拍照记录。
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文献和实验-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
Na2EDTA•2H2O,用NaOH调pH至8.0(约需2 g 左右的固体NaOH),溶解后定容至100 ml。(6)GUS酶提取液:0.1 M 磷酸缓冲液(pH7.0)取50 ml;10% SDS取1 ml; 0.5 M EDTA(pH8.0)取2 ml;Triton X-100取100 ul;β-巯基乙醇100 ul;用水定容至100 ml。(7)MUG底物:称8.8 mg MUG,溶于10 ml GUS酶提取液中,配制成2 mmol/L 的工作浓度。(8)反应终止液(0.2 mol/L Na
水研磨成匀浆,转移到 离心管 中,再用6mL 蒸馏水分次洗涤研钵,洗涤液收集于同一 离心管 中,放置0.5~1h 以充分提取,然后在4 000r/min 离心20min,弃去沉淀,上清液转入10mL 容量瓶,并以蒸馏水定容至刻度,即得待测样品提取液。 (2)测定:另取2 支10mL 具塞 试管 ,按下表取样。吸取提取液0.1mL(做一重复),放入具塞刻度 试管 中,加入5mL 考马斯亮蓝G-250 蛋白
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