- ￥30 - 60
- 万生昊天/WSHT
- 美国
- ES005
- 2026年01月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Protein Sample Loading Buffer for Native Gel, 5X (NO DTT)
- 库存：
100
- 供应商：
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格：
2*1ml/5*1ml
| 规格： | 2*1ml | 产品价格： | ￥30.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5*1ml | 产品价格： | ￥60.0 |
5X Native-PAGE蛋白上样缓冲液(Protein Sample Loading Buffer for Native-PAGE, 5X (NO DTT))，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以用于常规的Native-PAGE蛋白样品的上样。本产品不含SDS且不含DTT。
保存条件：-20度保存, 有效期12个月。
注意事项：
使用说明：
操作步骤：
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文献和实验免疫印迹法（immunobiotting test，IBT）
，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。更方便的方法是选用成套的裂解液和定量试剂盒测定蛋白质。如果浓度过高，可按比例稀释，读出蛋白浓度后，再折算回原样品浓度。 3. 电泳(Electrophoresis) 配制SDS-PAGE凝胶，在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS
器上）2 小时。3. 4 ℃ 下在微型离心机中以 16000 × g 离心 20 分钟。轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清液转移至放置在冰上的新离心管中。弃去沉淀。二、样品制备1. 取出小部分 (50 μL) 裂解物，用于蛋白分析。确定每种细胞裂解物的蛋白浓度。2. 向剩余体积的细胞裂解物中加入等体积的 2× Laemmli 样品缓冲液。我们推荐采用以下方法来还原样品和使样品变性，除非在线抗体数据表指明应使用非还原和非变性条件。3. 还原和变性：在 100 ℃ 下将样品缓冲液中的每种细胞裂解物煮沸
糖，建议进行 Pre-clear；如果使用磁珠，此步可忽略 抗 X 抗体的轻链（25 kD）和重链（50 kD） 更侧重于如何在实验上进行优化（见下文） *注意：总蛋白上样量过多也会造成 非特异性结合，建议上样量为 500 ug-1 mg。上样之前一定要先用 BCA 定个量！定个量！定个量！ pre-clear：上样前先用裂解液过一遍柱子，减少基质本身对蛋白的吸附 Output：在某些 co-IP 实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测
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