hg DNA Quant & QC kit with SYB

qPCR常见问题及其分析

PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

哪个是实验组，哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。 E. 对照组和内参基因的设置：这个是为后面的定量做准备 F. 反应程序的设置：PCR 反应程序的设置要根据不同公司的 MasterMix。比如 BioTeke 的95 ℃ 2 分钟就可以激活 DNA 聚合酶（ABI 的需要 10 分钟）。循环反应是 95 ℃ 15 秒，60 ℃ 15 秒的 40 个循环。溶解曲线程序采用仪器默认设置就可以。或者是仪器说明书上建议的程序。 G. 反应体系的设置： A-G 这五个步骤简单

Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手

为“BioTeke”，进行“定量”实验。 B. 实验方法的选择：我们选用的比较Ct的SYBR Green方法， Fast程序，以cDNA为模板进行。 C. 目的基因的设置：有几个目的基因和目的基因的名称。 D. 样品的设置：包括哪个是实验组，哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。 E. 对照组和内参基因的设置：这个是为后面的定量做准备 F. 反应程序的设置：PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶（ABI的需要