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文献和实验Mouse p27 PCR Using Gitschier Buffer
with H2O and aliquot into 1.5 mL eppendorf tubes PCR Reaction Mix (To make a fresh master mix, multiply # PCR reactions x volumes, below) 2 µL KG-1 (10x) 1x 2 µL KG-2 (10x) 1x 2 µL Primer 1 (1uM) 0.1 mM 2 µL Primer 2 (1uM) 0.1 mM
Gel Mobility Shift Assay Conditions -Mg/EDTA in Gel and Buffer
:20 microliter binding reaction:4 microliters 5X binding buffer0.2 microliters 0.1 M DTT2000-5000 cpmlabeled DNA0.125 micrograms p[dG-dC]H2O to 20 microliters final volumeAdd proteins to reaction last.Incubate protein and DNA at room temperature
【求助】如何提取细胞中的cAMP?和普通蛋白的裂解buffer一样么?
试剂盒出售,不是基于ELISA法的,比ELISA法更方便。 苏叶 我用的是125I的RIA kit,我们核同位素室的老师说,照常处理你的细胞,离心去上清后加入0.4ml 1M的高氯酸就可以了。不过要预实验一下,摸索浓度。 我这几天也在做细胞内cAMP和cGMP检测。 sosorunning 普通的Lysis buffer 就可以,但是你得加IBMX抑制PDE的活性。不知道你是想做western还是干吗? 如果你是要测
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