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- 2025年11月26日
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天根生化科技（北京）
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50次×50ul体系
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文献和实验REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
许多工作的。实在不行，如果有MONEY，那就用TAQMAN，买ABI的KIT，那些公司都优化好的，基本可以直接使用，何况SYBR GREEN I的特异性不如TAQMAN，而且如果摸了无数次都不能获得良好的结果，那些花掉的MONEY还不如买现成的，即省钱省时省力，不过就是丧失了从不断的失败痛苦中寻找成功的喜悦了。
引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物2. oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难3. 特异引物：最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。PCR 优化PCR优化主要有：1. 引物的浓度2. 建议使用SYBR Green I和EvaGreen 进行扩增和溶解曲线的测试笔者建议的操作流程I．靶的选择和试验设计1. 针对目的基因序列选择合适的扩增片断查看以下三个网站是否
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