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流式检测细胞凋亡
- 提供商:
无锡菩禾生物医药技术有限公司
主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。
Annexin V是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,是公认的检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行绿色荧光(FITC或EGFP)标记后作为探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。
流式检测细胞凋亡实验步骤
收集细胞,细胞洗涤,乙醇固定,细胞重悬,细胞过滤,染色,流式细胞仪检测,结果判断
结果展示:
实验完成周期及交付标准:
1.实验周期: 根据样本
2.交付标准:
1、流式检测凋亡原始图片;
2、详细实验报告,包含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
需确认的信息(客户提供):
1. 客户提供检测样本(细胞,客户提供处理好的细胞,或者我们代培养及处理细胞,则需收取相应的细胞扩培及处理费用大约需要1*10^6/样)
收费标准:
菩禾生物所有服务项目:
| 细胞平台 | 行为学检测 | 动物模型 |
| 原代细胞制备与培养 | 水迷宫检测 | 慢性胰腺炎模型 |
| 细胞培养、传代 | 十字架 | 肝纤维化模型 |
| 原代细胞传代培养 | 非酒精性脂肪肝 | |
| 细胞系STR鉴定服务 | 动物模型 | 骨质疏松模型 |
| 细胞转染 | 小/大鼠饲养 | 糖尿病模型 |
| MTT细胞增殖、活性、毒性检测 | 小/大鼠灌胃 | 眼外伤模型 |
| CCK8细胞增殖、活性、毒性检测 | 兔子饲养费 | 青光眼模型 |
| 流式细胞凋亡检测 | 大鼠灌胃 | 烧烫伤模型 |
| 流式细胞周期检测 | 小鼠灌胃 | 短肠模型 |
| 血管形成实验(非钙染/钙染) | 兔子灌胃 | 肾衰模型 |
| ROS检测 | 腹腔/肌肉给药(大小鼠) | 肾炎模型 |
| 划痕实验 | 腹腔/肌肉给药(兔子) | 尿路结石 |
| 克隆形成实验 | 尿液/粪便采集 | 高氧/低氧损伤模型 |
| 粘附实验 | 血液采集 | |
| transwell实验(迁移) | TTC染色 | 病理平台 |
| transwell实验(侵袭) | 超声检测 | 组织包埋 |
| 贴壁/悬浮细胞转细胞株构建 | 血常规检测 | 冰冻/石蜡切片 |
| 耐药细胞株筛选构建 | DR检测 | HE染色 |
| 骨组织切片 | 其他特殊染色 | |
| 分子平台 | microCT | 全扫描拍照 |
| 载体构建 | 皮下瘤模型 | 扫描电镜 |
| 细胞/组织/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射电镜 |
| mRNA/miRNA等引物设计 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
| RT-qPCR检测 | 心肌缺血再灌注模型 | |
| CHIP检测 | 门静脉高压动物模型 | |
| EMSA检测 | 高血压动物模型 | |
| 双荧光素酶实验 | 心肌梗死动物模型 | |
| 原位杂交 | 动脉粥样硬化动物模型 | |
| 脑缺血再灌注 | ||
| 免疫平台 | 肾性高血压模型 | |
| 蛋白(核/膜/总)提取 | 主动脉弓狭窄模型 | |
| 蛋白含量测定 | 脊髓损伤模型 | |
| Western Blot检测 | 背根神经节损伤模型 | |
| COIP | 脑瘫模型 | |
| 免疫组化/荧光 | 癫痫模型 | |
| 抑郁症模型 | ||
| 行为学检测 | 肾脏缺血再灌注模型 | |
| 水迷宫检测 | 关节炎 | |
| 十字架 | 肺气肿模型 |
六、实验服务流程
无锡菩禾生物是一家专业提供生物医药技术服务和细胞整体解决方案的高科技企业。拥有CMA 质量体系认证的实验室,5大技术平台(细胞平台、分子平台、免疫平台、病理平台、动物平台),以专业、严谨、求真、高效服务理念,为全国科研工作者提供一站式技术检测服务。
公司地址:江苏省江阴市砂山路85号
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文献和实验
HPV 并不是宫颈癌唯一的「元凶」?这种微生物化身「帮凶」,共同促进癌症发生
修复通路 由于 E2F 转录因子家族(参与细胞增殖和生长停滞的几个基因的重要调节因子)被沙眼衣原体和共感染下调,研究人员进一步分析了 E2F 转录因子家族在衣原体感染细胞中发挥的作用。 RB 样、E2F4、多种外阴 B 类蛋白和二聚化伴侣(DP1)通过形成 DREAM 复合物,可介导基因抑制促进静止。若失去细胞周期检查点基因表达,DREAM 复合物介导的调控将会中断,进而打破细胞周期的平衡,从静止切换到增殖,这在癌症中经常观察到。 该研究分析显示,许多 DREAM 复合靶基因被衣原体下调,在合并感染中
固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次,每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min,1 × PBS 浸洗玻片 3次,每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤), 1 × PBS 浸洗玻片 3 次,每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS,在玻片上滴加 5% 的正常血清(与二抗种属来源一致或相似),室温封闭 1 h
3 篇 Nature 连发,解决世纪难题,周期蛋白的毁灭调控蕴含癌症患者的新生
在 cyclin D 上,被泛素化标记的 cyclin D 将会被蛋白酶体降解。此外研究还发现,AMBRA1 缺失会导致 cyclin D 和 MYC 蛋白水平升高。cyclin D 与 CDK4/6 结合,使 RB1 蛋白磷酸化。磷酸化 RB1 释放 E2F 转录因子来驱动细胞周期进程所需基因的表达。在 AMBRA1 缺失的细胞中,cyclin D 也能与 CDK2 激酶形成复合物,使癌细胞能够抵抗 CDK4/6 抑制剂的治疗。高水平的 cyclin D 会促进细胞增殖,从而导致 DNA 损伤、复制应激
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