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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Proteasome Maturation Protein (POMP)
- 库存:
1000
- 供应商:
上海信裕
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 19.5kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Met1~Leu141 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in PBS, pH7.4, containing 5% trehalose, 0.01% sarcosyl. |
MNARGLGSEL KDSIPVTELS ASGPFESHDL LRKGFSCVKN ELLPSHPLEL SEKNFQLNQD KMNFSTLRNI QGLFAPLKLQ MEFKAVQQVQ RLPFLSSSNL SLDVLRGNDE TIGFEDILND PSQSEVMGEP HLMVEYKLGL L
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验问:请问各位高手,我想让酵母蛋白酶A失活,决定采用PCR进行DNA序列的突变,此法行的通吗?可有前人研究过? 答:国外有了"蛋白酶缺失"的用于重组蛋白表达的菌株。国内也许也有,小龙对于上游不大懂,不知道自己构建蛋白酶缺失的酵母菌是否有技术上的难度。参见一篇综述《生命的化学》2003 年23 卷1 期CHEMISTRY OF L IFE 2003,23(1) 酵母表达系统及其应用研究。 假如只是为了降低重组蛋白表达时被水解的可能,在提取液中加入蛋白酶抑制剂如PMSF可以部分解决。
因素,此时杂质如蛋白酶必须尽快除去。 回收率:随着纯化的进行渐趋重要,因为纯化产物的价值在增加。 在三阶段纯化策略中每一种方法的适用性见下表: 技术 主要特点 捕获 中度纯化 精制 样品起始状态
表达量,在受到IPTG诱导时也能较好的表达蛋白。 (3)包涵体表达:包涵体蛋白折叠混乱、二硫键配对混乱、没有生物活性、变复性条件需要长时间摸索等,即使包涵体蛋白成功复性,其均一性和活性依然备受质疑。但是包涵体表达也有其优势:能够很轻松的获得超高的表达量,不可溶的重组蛋白不会被宿主内的蛋白酶降解,重组蛋白的毒性被大大抑制,杂蛋白含量低(~10%),容易纯化等。由于这些优点以及蛋白质复性条件的不断发展,表达包涵体蛋白逐渐为人们所接受,成为重组蛋白表达的一个常用方案。与可溶蛋白相反,提高培养温度、延长培养
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