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文献和实验本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选,宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉(lacZΔΜ15)。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白,可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株,如BL21(DE3)。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时(>7-8 kb),经转化
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr 4:JM109菌株 该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株 基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15
&id=1143430&sty=3&keywords=%B8%D0%CA%DC%CC%AC 求助!感受态又出问题了! 感受态细胞的选择问题 求助:感受态细胞可以作为菌株来源并再制作感受态细胞吗? 请教各位大虾如何制作转化效率高的BJ5183化学感受态 救急,询问感受态的制备 感受态细胞菌种检验问题 Cacl2法制备感受态不成功得原因 感受态细胞会影响抽提质粒? 请教dqlover等人-关于TSS法制备感受态 连接载体的DNA转化Takara JM109感受态细胞
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