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- 鼎国
- AR-0531
- 北京
- 2025年07月11日
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- 文献和实验
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大量
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鼎国
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50ml
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文献和实验。 1）高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0，工作液）或0.001M EDTA（pH8.0）注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上，放入锅内，使切片位于液面以下，盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时（约加热5~6分钟后），计时1~2分钟，然后将压力锅端离热源，冷水冲至室温后，取下气阀，打开锅盖，取出切片，蒸馏水洗后，PBS洗2分钟×3，下接免疫组化染色步骤。 2）煮沸热修复 切片脱蜡至水后，放入盛有 0.01M 枸橼酸钠缓冲溶液（pH
NaCl，然后缓慢加入 10 g CTAB (十六烷基三甲基溴化铵)，同时加热并搅拌，可加热至 65℃ 溶解，定容终体积至 100 mL。3. CTAB 沉淀液： 1% (w/v) CTAB，50 mM Tris.Cl (pH8.0)，10 mM EDTA(pH8.0)4. 高盐 TE 缓冲液: 10 mM Tris.Cl (pH8.0)，0.1 mM EDTA (pH8.0)，1M NaCl【实验方法与步骤】1. 在所需量的 CTAB 抽提液中加入 2-巯基乙醇，使终浓度达 2% (v/v
钠，5mmol/L DETA(pH8.0)4）甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置，紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose （Sigama），再加20mL 10×TAE Buffer，144mLDEPC处理过的双蒸水，微波炉中化胶，待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛，放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1） 样品制备，RNA总量10μg，5×甲醛凝胶电泳缓冲液
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