WB封闭液

WB 为何又翻车？

① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱

WB 样品粘稠像「鼻涕」怎么办？

「救命！做 WB 蛋白样品提取时，样品加入裂解液，离心后发现管里有很多的胶状物，非常粘稠，有点像鼻涕！多加裂解液稀释一下仍然没有效果，蛋白浓度还变得很低。不死心的我把它戳出来玩了一会，戳戳戳仍然是一大团，这粘稠物是什么？对我的后续实验会有什么影响？」 当你看到这团粘稠的「鼻涕」，就意味着你即将经历下面五个难题的考验： 1. 样品吸液困难 堵塞移液器：离心后吸上清液的时候胶状物会堵塞移液器头，移液后上清液所剩无几。 无法分离上清液：样品太

WB方法

毛毛虫0118 我想用人血标本做WB，请问血标本最多可以放多久啊？还有做WB的话，要收集大概多少毫升血就可以了呢？ 毛毛虫0118 为什么没有人回复我啊？ volano 建议你还是自己摸索一个量 首先，不知道你要做的目的蛋白是什么？分子量有多大？是不是容易降解？ 如果分子量大，不容易降解，那可以储存比较长时间，如果你的目的蛋白是小蛋白那就是越新鲜越好吧，我看过师姐做的12KD